MK2基因敲除对小鼠急性胰腺炎炎症反应的影响及机制研究

急性胰腺炎合并多器官功能障碍综合征(MODS)是导致患者死亡的主要原因，炎症反应在其中发挥了主要作用。我们前期的研究提示,细胞丝裂原激活的蛋白激酶类（MAPKs）／MK2信号通路参与该炎症的调控，但机制不清。本项目用C57BL小鼠在体纯合子MK2基因敲除型（mk2-/-）和野生型（wild-type），腹腔注射雨蛙肽（cerulein）、或雨蛙肽加内毒素复制小鼠轻、重型急性胰腺炎，检测胰腺酶学指标变化，检测与胰腺局部和全身炎症反应有关指标，包括细胞因子和趋化因子（TNF-α、IL-6、IL-10、MCP-1、CINC和MIP-2等）的表达、肺组织髓过氧化物酶活性、胰、肺等组织学的改变等，比较两型小鼠在相同疾病时的不同反应；检测胰腺组织4类热休克蛋白的表达，评估细胞自身保护机制的变化。以揭示 MAPKs ／MK2信号通路对急性胰腺炎炎症反应的调控及机制，为新的抗炎药靶提供新思路和实验依据。

本研究主要探讨细胞丝裂原激活的蛋白激酶（MAPKs）／MK2信号通路在急性胰腺炎合发病机制中的作用及其作用机制。实验研究用C57BL小鼠在体纯合子MK2基因敲除型（MK2-/-）和野生型（wild-type），或用p38MAPK抑制剂SB203580(SB)处理C57BL小鼠，干预该信号通路，比较不同处理小鼠在急性胰腺炎时的不同反应；同时检测胰腺组织热休克蛋白的表达，评估细胞自身保护机制的变化,以揭示 MAPKs ／MK2信号通路对急性胰腺炎炎症反应的调控及机制，为新的抗炎药靶提供新思路和实验依据。第一部分结果表明：MK2基因删除型小鼠在雨蛙肽诱导的急性胰腺炎时局部和全身的病变程度较轻，胰组织中胰蛋白酶活性和血清淀粉酶活性较低；血清IL-6水平和肺组织髓过氧化物酶活性（MPO）也降低。热休克蛋白25（HSP25）的表达在MK2基因删除鼠和野生型小鼠差异不明显，而HSP60的表达在两类鼠的AP组织明显增强， 尤其在MK2基因删除鼠的变化更为明显。第二部分结果表明：用p38MAPK抑制剂SB203580(SB)抑制p38MAPK的活化，HSP60和HSP70在胰腺中的表达下降，同时，血液中的炎症介质及肺中的MPO降低。在离体实验中，用雨蛙肽刺激离体的鼠胰腺组织4小时，腺泡细胞中的p38MAPK被激活，伴有热休克蛋白60和70过表达，并且细胞培养上清液中的炎症介质水平升高。SB可逆转雨蛙肽刺激引起的炎症介质水平升高和热休克蛋白60和70表达的变化。类似的作用在实验性溃疡性结肠炎中也看到。研究结果揭示，p38MAPK在消化系统常见炎症性疾病如急性胰腺炎、溃疡性结肠炎的炎症反应中起有非常重要的作用，抑制p38MAPK及其下游蛋白激酶2(MK2)能有效抑制炎症介质的生成，改善局部和全身都炎症反应；抑制MK2很有可能成为治疗这些疾病的药物靶点；p38MAPK/MK2不同程度参与炎症反应时一些热休克蛋白（HSP25、HSP60、HSP70）表达的调控，其机制和意义值得进一步研究和阐明。