IFNγ在异基因造血干细胞移植中aGVHD双向调节的机理研究

急性移植物抗宿主病（aGVHD）主要累及以皮肤、胃肠道、肝脏、肺脏为主的靶器官；临床上糖皮质激素作为aGVHD一线治疗对各靶器官的疗效存在差异，提示参与aGVHD各靶器官损伤的病理生理机制可能不同。国外及我们前期研究表明干扰素γ（IFNγ）在aGVHD致肺、皮肤损伤中起负性作用，在致肠道损伤中起正性作用，其双向调节机理不明。基于IFNγ在aGVHD发生发展中的作用，通过建立野生型和IFNγ基因缺陷小鼠aGVHD模型，采用基因与蛋白组学、组织病理定量流式细胞仪计数等技术，研究在IFNγ存在或缺乏情况下，aGVHD皮肤、肠道、肝脏、肺组织中基因与蛋白表达的变化与差异，免疫活性细胞质和量的变化，组织内细胞/趋化因子及免疫活性细胞表面细胞/趋化因子受体表达差异，从而揭示IFNγ在aGVHD不同靶器官损伤中差异性调节的物质基础和分子机理，为aGVHD靶器官损伤寻找有效的治疗靶标提供物质与理论基础。

本研究按研究计划完善和构建了稳定的急性移植物抗宿主病（aGVHD）模型，建立IFNγ基因缺陷小鼠异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）移植后aGVHD动物模型，建立稳定的检测平台，通过采用基因和蛋白组学技术，完成aGVHD靶组织中基因与蛋白表达的差异和鉴定，发现移植后+7，+14d，+21d皮肤、肺脏、肝脏、肠道内IFNγ、IL-2、TNFα 、IL-4、 IL-10 、IL-17水平存在差异。通过IFNγ对肺内皮和上皮细胞株、肠道上皮细胞株Jak/Stat信号传导途径的影响研究，发现IFNγ具有双向调节作用，小剂量的IFNγ可抑制或减轻GVHD致肺纤维化形成，增加肠道内效应性T细胞浸润，加重肠道GVHD。本研究首次揭示IFNγ在aGVHD不同靶器官损伤中差异性调节的物质基础和分子机理，为aGVHD靶器官损伤寻找有效的治疗靶标提供物质与理论基础。. 此外，基于IFNγ对肺、肠道差异性调节的基础和Toll样受体（TLRs）信号通路在维持胃肠道正常菌群及屏障功能中的作用，课题组在现有研究基础上对GVHD致肠道干细胞及潘氏细胞损伤的机制进行深入研究，提出TLRs信号通路异常可能参与GVHD致肠道干细胞及潘氏细胞损伤的假说。研究还发现肺上皮-间质转化通路可能参与GVHD肺损伤修复和肺纤维化过程。. 学术成绩：在本项目研究期间，申请者导师刘启发教授与美国加州City of Hope 国家医学中心Beckman研究所Defu Zeng教授建立相关研究合作，申请者本人于2011.01-2012.03在Zeng教授所在的造血干细胞移植部门进行课题相关研究，充分利用国外先进的研究技术和研究资源，为本课题开展提供了有利的实验平台，并为本课题的顺利进行提供了保证。. 在本项目研究基础上，共发表文章 36篇，其中SCI全文文章8 篇， 25篇论文被选为2011年、2012年、2013年美国欧血液学年会（ASH）壁报交流，并在《Blood》杂志上（SCI收录）发表；多篇论文参加全国血液学会议并进行大会报告，增进了国内同行对本课题相关研究领域的认识交流。