RAS相关非可控性炎症引起上皮恶性转化的调控网络及其关键节点的监测研究

RAS突变或激活与多种肿瘤如肺癌、胰腺癌、结肠癌、卵巢癌和乳腺癌等的发生和发展密切相关，但临床上尚无系统和有效的预警措施。本项目的前期研究表明，RAS可以上调多种炎性细胞因子如白介素6、白介素8和生长调节致癌基因1等的分泌或表达，诱导间质细胞炎性衰老，并刺激肿瘤微环境中炎性因子的旁分泌及其与受体的相互作用，最终引起上皮细胞癌变。在这一非可控性炎症恶性转化的调控网络中，RAS活化、细胞炎性因子分泌和表达、间质细胞衰老可能是其关键节点。本项目拟在细胞、动物模型和人体组织中，定量测定RAS活化转移酶（法呢酰转移酶或香叶烯转移酶）活性、RAS羧基端半胱氨酸甲基化水平、核转录因子NF-kB转录活性和间质细胞衰老状态等，结合临床资料，通过分析RAS调控网络及其关键节点与肿瘤发生和发展的相关性，初步建立一套系统监测RAS相关非可控性炎症恶性转化的技术方法，以期对RAS相关肿瘤的发生和发展进行有效预警。

RAS家族成员主要有KRAS、HRAS和NRAS。RAS突变或扩增促进炎症发生和肿瘤的发生发展。我们首先在肺癌细胞中发现KRAS突变抑制p53功能，却激活NF-κB活性，诱导肺上皮细胞发生炎症和恶性转化，并通过促进细胞周期和抑制细胞凋亡促进肺癌细胞的生长和对化疗药物的抵抗；其次在宫颈癌中，高危型人乳头瘤病毒（HPV）E6蛋白可以激活RAS相关信号IL-6/STAT3通路，诱导成纤维细胞衰老，在肿瘤微环境中通过自分泌和旁分泌途径促进宫颈上皮细胞的炎-癌转化；接着，我们在卵巢癌细胞中发现RAS下游信号的关键分子极光激酶Aurora-A，通过抑制BRCA2诱导细胞周期紊乱、细胞四倍体增加和染色体异常，导致细胞整体基因组不稳定性，促进卵巢癌的炎-癌转化；同时Aurora-A还与BRCA1/2拮抗，通过FTb/IGFBP3、ATM/Chk2或Slug/Fibrillin 1（FBN1）调节RAS活化、DNA损伤修复或细胞侵袭，从而促进卵巢癌对放、化疗的抵抗以及转移；最后我们还针对RAS相关靶分子设计合成了苯甲磺酰氟与香豆素杂合物以及四甲氧基查尔酮，在卵巢癌细胞中进行了敏感性测定，取得了一定的效果。因此我们的研究结果表明：RAS相关非可控炎症向恶性转化的过程中，涉及到细胞中各种信号通路包括细胞周期、细胞衰老、DNA损伤修复、染色体不稳定性、肿瘤微环境等，其关键节点调控分子包括p53、NF-kB、FTb/IGFBP3、Aurora-A/B、BRCA1/2、HPV E6、IL-6/STAT3、SLUG/FBN1等，靶向这些分子的特异性药物有可能控制RAS诱导的炎症向恶性转化，因而可能用于防治RAS相关肿瘤的发生和发展。