基于miRNA在无功能性胰腺神经内分泌肿瘤中的表达差异探讨清胰化积方“跨物种调节”的作用机理

Based on our former work, this study is going to detect the miRNA expression in non-functional pancreatic neuroendocrine tumor(NF-PNET) and healthy controls. By exploring the characteristic miRNA expression of NF-PNET, its pathogenesis on post-transcriptional level may be discovered. The acquired fingerprint spectrum can be used for its diagnosis and differential diagnosis,as well as the promising therapeutic targets; Plus, according to the scientific breakthrough published in <cell research> ,2014, by Chinese scientists,this study at the first time explore the mechanism that exogenous miRNA from herbs of Qingyihuaji Recipe intervene the endogenous miRNA transcription. Thus, the gene terget of Qingyihuaji Recipe’s may be discovered. This study will also provide persuasive evidence from laboratory to support the good therapeutic response with Qingyihuaji Recipe. Also, this study may give a brand new idea in scientific research of Chinese medicine.

本研究在大量前期工作的基础上，对无功能性胰腺神经内分泌肿瘤（NF-PNET）患者与正常人外周血中的miRNA表达进行检测，通过探索NF-PNET发病特征性miRNA的表达，可在基因转录后水平阐释其发病机理；获得的NF-PNET miRNA“指纹图谱”，可用于疾病的诊断与鉴别诊断，亦可作为其治疗的潜在靶点；同时，本研究借鉴2014年中国学者张辰宇发表在《cell research》上的突破性研究成果，率先从清胰化积方外源性miRNA“跨物种调节”的角度探索中药复方的作用机理，阐释对NF-PNET有良好疗效的清胰化积方在基因转录后水平的作用机理，并寻找其作用的靶基因及靶信使RNA；从“跨物种调节”的角度探索中医药的疗效机理，可为中医药治疗肿瘤的研究提供崭新的思路，并为清胰化积方治疗NF-PNET提供充分且有说服力的实验室依据。

【研究目的】探索无功能性胰腺神经内分泌肿瘤（non-functional pancreatic neuroendocrine tumor, NF-PNET）发病相关的miRNA 表达；研究清胰化积方中的植物性miRNA 进入到人体参与靶基因的调节。.【研究方法】选取符合入组条件 NF-PNET 患者共 48例，观察临床生存,并对其中 25例患者行 miRNA检测，并以20例健康人做为对照。.【研究结果】1.本研究发现清胰化积方在改善NF-PNET患者中医临床疗效、KPS 评分、中医临床症状、肿瘤大小、生存时间等方面，中药治疗组与对照组相比差异具有统计学意义（P<0.05）。2.正常组和NF-PNET组中 miR-3630， miR-395，miR-408，miR-21，miR-1450 这 5 个 miRNA 相对调变结果具有统计学意义(△P<0.05)。 miR-3630等 4 个 miRNA 差异性表达呈上调表现，miR-1450 差异性表达呈下调表现，miR-1450 作为白花蛇舌草的成分之一，在正常组和清胰化积方组间具有显著差异（P<0.05）。3. NF-PNET患者的 mRNA 靶基因 IFN 和 IL-6相对于内参 Gapdh 的表达量，肿瘤组高于正常组，差异有统计学意义（P<0.05）；对照组和正常组对比，IFN 和 IL-6的表达量有显著差异（P<0.05）。4.肿瘤组血浆中 IL-6与正常组相比，差异有统计学意义（P<0.05）；中药组和对照组血浆 IFN 相比，对照组高于中药组，差异有统计学意义（P<0.05）；对照组和中药组血浆 IL-6 相比，差异有统计学意义（P<0.05）。.【科学意义】本研究探索了清胰化积方在NF-PNET治疗中的价值，并发现清胰化积方通过长时间口服可从外源性途径进入人体，调节NF-PNET的靶基因，可能在基因转录水平上干预NF-PNET的发生发展过程；为中医药治疗NF-PNET提供了较充分的实验室证据，也为中医药抗肿瘤研究提供了新思路。