从胃肠道间质瘤miRNA的表达差异探讨扶正消积方“跨界调节”的作用机理

Based on our former work, this study is going to detect the miRNA expression in Gastrointestinal Stromal Tumors, GIST and healthy controls. By exploring the characteristic miRNA expression of GIST, its pathogenesis on post-transcriptional level may be discovered. The acquired spectrum can be used for its diagnosis as well as the promising therapeutic targets; Plus, according to the scientific breakthrough published in <cell research> Sep,2011 by Chinese scientists,this study at the first time explore the mechanism that exogenous miRNA from herbs of FuZhengXiaoJi Recipe intervene the endogenous miRNA transcription. Thus, the gene terget of FuZhengXiaoJi Recipe’s may be discovered. This study will also provide persuasive evidence from laboratory to support the good therapeutic response with FuZhengXiaoJi Recipe. Also, this study may give a brand new idea in scientific research of Chinese Medicine.

本研究以我科前期工作为基础，对胃肠道间质瘤患者与正常人外周血中的miRNA表达进行检测，通过探胃肠道间质瘤患者的特征性miRNA的表达，拟在基因转录水平阐释其发病机理；获得胃肠道间质瘤患者的miRNA图谱，用于疾病的诊断，同时也可作为治疗的潜在靶点之一；同时，本研究根据2011年中国学者发表在《cell research》上的关于跨界蛋白的研究成果，尝试从扶正消积方外源性miRNA“跨界调节”的角度探索中药方剂的可能作用机理，阐释对胃肠道间质瘤有良好疗效的扶正消积方在基因转录后水平的作用机理，并寻找其作用的靶基因及信使RNA；从“跨界调节”的角度探索中医药的疗效机理，可为中医药治疗肿瘤的研究提供新的思路，并为扶正消极方治疗胃肠道恶性肿瘤提供更充分，有意义的实验室数据。

【研究目的】：寻找胃肠道间质瘤发病相关的特异性miRNA表达谱；探索扶正消积方中的外源性植物miRNA是否可以跨界调节进入到人体以及如何参与基因转录水平的调节。【研究方法】：选取符合入组条件GIST病人共46例，分别观察临床生存并对其中18例患者行miRNA、IL－6、IL-10、IFN和TGF－β检测。.【研究结果】：1.本研究表明扶正消积方在改善胃肠道间质瘤患者中医临床疗效、PS积分、中医临床症状、肿瘤大小、生存时间等方面，中药组与对照组相比，差异有统计学意义（P<0.05）。2.正常组和肿瘤组中miR196a，miR21，miR376c，miR206, miR5077这5个miRNA相对的调变情况有统计学差异(△P<0.05)。miR196a等4个miRNA差异性表达均呈下调表现，miR5077差异性表达呈上调表现，miR5077作为黄芪确定的成分之一，在正常组和中药组间有显著性差异（P<0.05）。3. GIST病人的mRNA靶基因IL-10和TGF-β相对于内参Gapdh的表达量，肿瘤组高于正常组，差异有统计学意义（P<0.05）；对照组和正常组对比，IL-10及TGF-β的表达量有显著差异（P<0.05）。4.通过ELISA法，肿瘤组血浆中IL-10与正常组相比，差异有统计学意义（P<0.05）；中药组和对照组血浆IFN相比，对照组高于中药组，差异有统计学意义（P<0.05）；对照组和中药组血浆IL-10相比，差异有统计学意义（P<0.05）。【科学意义】：本研究弥补了扶正消积方在胃肠道间质瘤临床方面研究的不足，研究发现扶正消积方通过长期口服可从外源性“信息摄入”的途径进入人体，“跨界调节”胃肠道间质瘤的靶信使RNA及靶基因，在基因转录的水平上干预胃肠道间质瘤的发病过程；为中药复方治疗胃肠道间质瘤提供了一定的实验室证据，为中医药抗肿瘤研究提供了全新的思路和方向。