促性腺激素释放激素II型（GnRH-II）的激动剂和拮抗剂在子宫内膜癌中作用分子机制研究

内分泌治疗是子宫内膜癌的重要辅助治疗手段，目前以孕激素为主，有效率15%-25%，亟待研究新的内分泌治疗药物。GnRH-I激动剂已用于临床治疗乳腺癌、前列腺癌等，临床实验性治疗内膜癌也有报道，但机理不清。我们前期证实GnRH-I激动剂和天然GnRH-II可直接诱导内膜癌细胞凋亡，抑制其增殖，而GnRH-II作用更强。本研究拟在此基础上对GnRH-II作用机制进行深入研究。研究内容包括：①GnRH-II激动剂/拮抗剂在内膜癌细胞中的作用机制；②PTEN、ER/PR表达状态是否影响GnRH-II激动剂/拮抗剂的作用；③孕激素对GnRH-II激动剂/拮抗剂的作用的影响；④探讨GnRH-II激动剂/拮抗剂在原代培养内膜癌细胞中的作用，分析其与GnRH亚型及其受体表达状态，PTEN、ER/PR受体表达状态的关系，为临床个体化内分泌治疗提供理论基础。

1. 本研究明确了子宫内膜癌组织与细胞中GnRH亚型及其受体的表达情况，GnRH亚型及其受体在子宫内膜癌组织中的表达较正常组织高。GnRH亚型及其受体的表达与病理分期、细胞分化、ERα、ERβ和PTEN的表达无明显相关性，GnRHR-I、GnRH-I mRNA水平与PR 的表达呈正相关。.2. 通过微小组织块培养+胰酶滤纸片克隆消化法进行子宫内膜癌原代培养，建立EAG3细胞系，并对其进行鉴定。应用慢病毒介导的RNAi方法，构建原代子宫内膜癌细胞系EAG3的PTEN基因敲减细胞株（EAG3-ND）。.3. 本研究发现GnRH-I拮抗剂Cetrorelix对于Ishikawa、RL95-2、EAG3细胞的抑制作用更显著，GnRH-II拮抗剂Trp-1则对HEC-1-A及HEC-1-B细胞的抑制作用更显著。Cetrorelix对于PC3细胞的抑制率最显著为69.7%， Trp-1对于HEC-1-A细胞的抑制率最显著为37.1%，该抑制作用与相应的GnRH受体分布直接相关，提示GnRH拮抗剂的作用是通过不同GnRHR介导的。其机制可能与PI3K/AKT、MAPK/ ERK信号通路中pAKT及pERK的去磷酸化相关。.4. MPA可通过降调GnRHR减弱两种拮抗剂对Ishikawa的抑制作用，可通过升调GnRHR-I增强GnRH-I拮抗剂对HEC-1-A的拮抗作用。GnRH拮抗剂可能通过上调PR表达提高Ishikawa-MPA对MPA的敏感性。体内实验也证实此现象。