NgBR-Ras信号通路在雌激素诱导的I型子宫内膜癌中的作用及机制研究

The high estrogen levels can promote the progression of the type I endometrial carcinoma（EC）. However, the underlying molecular mechanisms remain unclear. In our previous study, we found that NgBR, the receptor for Nogo-B, is highly expressed in type I EC than normal tissue. It has been reported that NgBR is required for Ras translocation to plasma membrane. Based on the findings above, we hypothesize that the estrogen-enhanced type I EC proliferation might be triggered through NgBR-Ras signaling pathway. Thus, we proposed the following aims in this project, 1) to establish EC cell line with NgBR being stably knocked down or over expression to determine if the estrogen-promoted cell proliferation is dependent on activation of NgBR expression; 2) to transfect NgBR stably over expressed cell line with devitalized Ras to determine if NgBR influences cell proliferation is related to Ras activity; 3)to evaluate the importance of NgBR-Ras pathway in estrogen-activated EC tumor growth in a mouse model. We believe that our project can broaden our understanding on the mechanisms of EC progression, and will provide a new strategy for EC treatment.

高水平雌激素是I型子宫内膜癌的主要病因，但其具体致病机制不明确。我们在前期研究中发现Nogo-B受体NgBR在I型子宫内膜癌患者的肿瘤组织中表达显著升高，另有研究显示NgBR能够影响Ras在细胞中的定位，基于此，我们提出假设: NgBR通过Ras信号通路介导雌激素对I型子宫内膜癌上皮细胞的促增殖作用，并通过以下实验进行证明：1). 构建NgBR稳定低表达或高表达的子宫内膜癌细胞系，证明雌激素通过刺激NgBR表达影响子宫内膜癌细胞增殖；2）向稳定高表达NgBR细胞系中转染失活的Ras，证明NgBR通过影响Ras活性促进子宫内膜癌细胞增殖；3). 通过细胞移植小鼠肿瘤模型证明NgBR-Ras通路参与对肿瘤生长的调控作用。我们的研究将提出新的子宫内膜癌发病分子机制，为该病的治疗提供新的作用靶点。

子宫内膜癌（EC）是发达国家最常见的妇科恶性肿瘤，自上世纪90年代初以来，发病率上升了约50%，女性一生中罹患EC的风险是1/41。虽然大多数患者诊断时发生在早期，5年生存率约为81%，可诊断为晚期或发生远端转移患者预后较差。子宫内膜样腺癌（EEC）是EC中最常见的病理类型，雌激素暴露条件的增加是该病的常见危险因素之一。多种肿瘤中都发现存在RNA调控网络的异常：lncRNA与mRNA之间通过竞争结合microRNA的竞争性内源RNA（ceRNA）网络的平衡被打破是肿瘤发生的驱动因素之一。本研究鉴定了一个新的lncRNA：lncRNA-N74受雌激素的刺激上调表达，并与NgBR竞争性结合miRNA-762，导致癌基因NgBR表达上调，激活Ras/Akt信号通路，诱导EC的发生发展。EC发生PIK3CA突变概率高达42~55%，其突变导致Akt的持续激活。本研究中，我们利用TCGA数据库通过差异分析获得了6个与PIK3CA突变相关的基因：HMP19, GRIA1, MESP2, CARTPT, CD177, SCGB2A2。根据这6个差异基因构建的风险评分的模型与实际结果一致，以该模型和临床病理因素作为参数的临床预测模型对患者的5年生存率预测一致性达到0.83。我们的研究成果，对于EC的发病机制，EC的标志物研究，以及EC患者预后评估都具有重要的意义和临床应用价值。