A族链球菌诱导巨噬细胞IL-6下调以逃避免疫攻击的机制研究

A族链球菌（GAS）是一类重要的G+致病菌，目前发现其致病性与逃避宿主的免疫攻击相关。巨噬细胞是重要的吞噬细胞，其受菌刺激后通过分泌炎症因子，趋化中性粒细胞及促进T,B细胞活化以清除病原体。前期工作显示GAS刺激巨噬细胞后并未使细胞表面的CD80/86和MHCII分子的表达明显升高，并下调IL-6的表达。这是否为GAS逃避免疫的又一策略？何种机制使巨噬细胞IL-6的表达下调？故在进一步实验中1.以NF-κB依赖的报告基因转染RAW264.7巨噬细胞，建立NF-κB表达检测体系，初步探寻IL-6的下调机制。2.在GAS作用下，通过EMSA检测巨噬细胞NF-κB，C/EBPβ是否活化并转位入核。3.利用免疫共沉淀技术获取相关蛋白，测序确定转录因子的本质。4.通过不同蛋白酶抑制剂阻断，确定参与转录因子激活的上游信号分子。以期为深入研究GAS逃避免疫的机制，寻找干预细菌感染的模式提供新的视角。

A族链球菌（GAS）是一类重要的G+致病菌，目前发现其致病性与逃避宿主的免疫攻击相关。巨噬细胞是重要的吞噬细胞，其受菌刺激后通过分泌炎症因子，趋化中性粒细胞及促进T,B细胞活化以清除病原体。前期工作显示GAS刺激巨噬细胞后并未使细胞表面的CD80/86和MHCII分子的表达明显升高，并下调IL-6的表达。这是否为GAS逃避免疫的又一策略？何种机制使巨噬细胞IL-6的表达下调？故在本研究中1.以NF-κB依赖的报告基因转染RAW264.7巨噬细胞，建立NF-κB表达检测体系，初步探寻了IL-6的下调机制。2.在GAS作用下，通过EMSA检测巨噬细胞NF-κB，C/EBPβ是否活化并转位入核。3.利用免疫共沉淀技术获取相关蛋白，确定下调炎症因子表达的转录因子。4.通过RNA干扰，基因敲除鼠等，确定了参与转录因子激活的上游信号分子。本研究为深入研究GAS逃避免疫的机制，寻找干预细菌感染的模式提供新的视角。