养正消积干预肿瘤腹膜转移的潜在价值及相关机制研究

Peritoneal metastasis is a frequently seen in patients with solid tumours in the peritoneal cavity and indeed a number of other organs，it is a very difficult condition to diagnose, and no effective methods was found to treat peritoneal metastasis. Our preliminary result indicate that DME25 the active component of YZXJ obviously inhibit ability of colorectal and ovarian cancer cells to adhere to ground-substance and mesothelial cells, hyaluronan (HA) inhibitor could inhibit the adherence mentined above alone or in coordination with DME25, indicating that DME25 could interrupt the adhesion process mediated by HA.Further investigation reveal that DME25 could inhibit peritoneal metastasis in ex-vivo models。In this proposal, we plan to investigate the influence of YZXJ on growth and metastasis ability of gastric cancer、colorectal cancer and pancreatic carcinoma cells, and on adhering、invading ability of tumor cells to mesothelial cells, and on growing、metastatic ability of vascular endothelial cell and angiogenesis, and further investigate the underlying mechanisms. The in-vivo model was also constructed to confirm the YZXJ's role in inhibiting peritoneal metastasis and involved mechanism, and finally deduce the potential clinical implication; and formation of a viable formulation that is viable for clinical use.

腹膜转移多见于多种腹腔实体恶性肿瘤中，难于诊断，目前尚无有效的治疗方法。前期结果提示养正消积活性成分DME25可明显抑制结肠癌、卵巢癌细胞与基质、间皮细胞的粘附，且透明质烷（HA）抑制剂可以单独或协同抑制以上的粘附作用，提示DME25可抑制HA介导的细胞粘附。进一步实验示DME25可在小鼠模型中抑制结肠癌细胞形成的腹膜转移。本研究拟进一步验证DME25对胃癌、结肠癌、胰腺癌细胞增殖、转移能力的影响；对肿瘤细胞粘附、侵袭间皮细胞能力的影响；对血管内皮细胞增殖、转移以及血管形成的影响，并探索相关机制；同时在小鼠腹腔转移体内模型中进一步验证DME25对腹膜转移的抑制作用和相关机制，并探讨其开发合理剂型、用于临床肿瘤腹膜转移治疗的前景。

肿瘤腹膜转移是临近腹膜脏器起源的肿瘤常见的远处转移方式，手术治疗难以根治性切除，系统静脉化疗，腹腔热灌注化疗以及腹腔化疗是目前治疗原发灶肿瘤以及同时存在的腹膜腔转移的治疗方法，但是对于大部分伴有腹腔转移患者仅能达到控制腹腔进一步进展延长带瘤生存期的效果，并不能有效逆转；在多数腹膜转移中，肿瘤细胞与间皮细胞的相互作用是肿瘤形成腹腔转移的第一个环节， 而后肿瘤细胞与间皮细胞互相粘附、侵袭生长形成腹腔转移灶，如能有效干预该环节，将可以有效预防腹腔转移的形成。.本研究主要研究中药制剂养正消极DMSO活性提取成分DME25对肿瘤细胞粘附的影响，主要通过传统细胞粘附实验以及 ECIS（Electriccell-substrate impedance sensing）实时定量检测方法检测DME25对肿瘤细胞粘附功能以及肿瘤细胞与间皮细胞粘附功能的影响，并通过蛋白质印迹,细胞免疫荧光染色等检测方法对其深层的分子生物学机制进行了探索，最后通过构建不同种肿瘤细胞的小鼠腹腔转移模型进一步验证了DME25对或体内腹腔转移形成的抑制作用。.本研究的结果显示：DME25可以有效抑制肿瘤细胞与基质面、腹膜间皮细胞的粘附，并可以有效抑制腹腔转移动物模型体内的肿瘤细胞粘附，其对肿瘤细胞粘附的抑制作用与CD44，透明质酸的相互作用有关，并可能通过影响SRC激酶信号通路产生生物学效应。.我们发现DME25是一种潜在可抑制肿瘤细胞粘附的有效成分，可以从预防肿瘤细胞在腹腔内粘附的环节早期抑制腹腔转移灶的形成，是一种潜在可以应用于腹腔转移预防治疗的新方法。