嗜碱菌Mrp Na+/H+ 反向载体的结构和功能研究

嗜碱菌膜蛋白系统介导的细胞外和胞内间的Na+循环是其嗜碱适应性的重要基础，而Na+/H+反向载体是Na+循环过程中的关键因素之一。Mrp Na+/H+反向载体是存在于嗜碱菌Bacillus的特殊的反向载体系统，其特殊性在于Mrp反向载体是由六至七个基因编码的膜蛋白组成的异体蛋白复合体，结构和作用机理有别于广泛存在的单基因编码的反向载体。本课题通过对嗜碱芽孢杆菌的Mrp系统的研究，从分子水平揭示其结构和功能的相关性，研究内容包括：克隆Mrp系统基因并构建含有亲和TAG的重组Mrp系统膜蛋白；通过优化蛋白质表达条件如表达载体、温度、培养基等实现重组Mrp膜蛋白的超量表达；利用亲和层析技术纯化含有亲和TAG的Mrp膜蛋白，研究其结构组成和功能相关性；对Mrp系统中两个主要的蛋白MrpA和MrpD进行功能活性分析。