HIF-1α在儿童免疫性血小板减少症Th17/Treg失衡中的作用及机制研究

Immune thrombocytopenia (ITP) is an organ-specific autoimmune disease. the pathogenesis has not been elucidated. Th17/Treg axis imbalance is one of factors leading autoimmunity. Newly discovered hypoxia-inducible factor-1 (HIF-1α) plays a key role in the balance of Th17/Treg. Our preliminary study showed that HIF-1α expression was elevated in ITP. On this basis, we will study the Th17/Treg axis imbalance, and the correlation of HIF-1α in children patients with ITP firstly . Bone marrow hypoxia can be simulated by TPO, as a factor promote the expression of HIF-1α. We will study whether or not increase of TPO in ITP patients lead to overexpression of HIF-1α and thus result to autoimmunity of ITP. It will be studied the influence of HIF-1α on Th17/Treg axis changes by blocking and over-expression HIF-1α in ITP patients. Our subject linked metabolic factors and the immune system and would provide a new experimental theoretical basis for the development of new therapeutic interventions.

免疫性血小板减少症（ITP）是一种器官特异性自身免疫性疾病，发病机制尚未阐明。Th17/Treg轴的失衡是自身免疫的主导者之一。新近发现低氧诱导因子-1α（HIF-1α）在调节Th17/Treg平衡轴中发挥关键作用。我们初步研究表明HIF-1α在ITP中表达升高。在此基础上，本课题首先研究儿童ITP患者是否也存在Th17/Treg轴失衡，并明确其与HIF-1α之间的相关关系。基于TPO可模拟骨髓缺氧状态，促进HIF-1α表达，进一步研究ITP患者是否因为TPO的增高而导致HIF-1α的过表达从而引发ITP自身免疫的发生；通过阻断及过表达HIF-1α，从正反两个方面系统地研究HIF-1α对ITP患者Th17/Treg轴变化及后续自身免疫变化的影响，明确HIF-1α在ITP中对Th17/Treg轴失衡的作用。将代谢因素与免疫系统联系起来，为开拓新的治疗干预措施提供新的实验理论依据。

根据研究计划，课题组对HIF-1α在儿童ITP患者Th17/Treg中的作用开展了研究。首先研究了儿童ITP的Th17/Treg的漂移现象及相关细胞因子的表达，发现治疗前未缓解组/复发组ITP患儿中IFN、IL-4的表达水平高于缓解组，而TNF、IL-6、IL-10的表达水平低于缓解组；治疗后未缓解组/缓解组的TNF、IL-2、IL-4、IL-6的水平高于缓解组，而IFN、IL-10的水平减低。此外尚对了解前驱疱疹病毒感染对年幼儿ITP发病时细胞免疫改变情况及一线治疗效果的影响，对62例病例（感染组24例，非感染组38例）进行了细胞免疫相关指标的检测。发现感染组的IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、TNF、INF-γ中位数均较非感染组减少，仅IL-17较非感染组增多。我们研究了ITP患者外周血中Hif-1α的mRNA及蛋白的表达水平以明确Hif-1α在不同水平表达的变化在ITP中的异常。结果显示，持续性ITP患者和慢性ITP患者之间Hif-1α的mRNA表达存在统计学差异。进一步的研究中，为了明确Hif-1α的基因多态性是否影响了ITP患儿的mRNA表达，对Hif-1α基因的三个多态性位点进行检测，结果未发现在ITP和正常对照之间存在遗传易感性差异。基于Hif-1α与Treg及STAT1之间的密切关系和相互影响，我们还研究了ITP患儿的FOXP3的mRNA及甲基化水平和FOXP3及STAT1的SNP多态性，结果发现ITP患儿存在Foxp3甲基化的异常。通过研究初步发现ITP患儿存在Hif-1α的mRNA表达异常，确切的机制还需要进一步的研究。ITP患儿的STAT1基因的 rs1467199 SNP对IFN-γ依赖的自身免疫机制存在潜在的影响。STAT1的SNP检测可能对预测儿童ITP的慢性化病程具有一定意义。共计发表标注资助的相关论文4篇，其中SCI收录论文2篇，参加国际血栓与止血大会并发言一次。