结膜上皮干细胞的鉴别、定位及其增殖分化的研究

现有文献已证实结膜上皮来源于结膜上皮干细胞，但对结膜上皮干细胞的定位尚存在争议；由于缺乏特异性标志，对其不能进行直接鉴别；对其增殖和分化调控的研究也不深入。本研究欲通过对不同部位结膜上皮BrdU标记滞留细胞、P63和ALP阳性细胞的检测；结膜上皮体外培养并观察其克隆形成率、生长曲线、细胞倍增时间、DNA合成活跃程度、对5- FU的耐受情况；观察EGF、FGF-β、TGF-α、TGF-β、HGF、视黄醛等对结膜干细胞增殖和分化的影响；单克隆培养及单克隆细胞株裸鼠皮下移植并观察其增殖分化情况；绿色荧光蛋白（GFP）基因转染示踪单克隆培养的结膜上皮的细胞分化等的研究，对结膜上皮干细胞进行鉴别和定位，探讨其增殖分化特性，观察其在不同的载体（羊膜、饲细胞、胶原膜等）的生长情况，摸索其最适增殖和分化条件，为正确认识结膜上皮干细胞及结膜上皮干细胞移植的临床应用打下理论基础。