LRP16调控NFkB的分子机制及其在乳腺癌中的研究

NF-kB过度激活是雌激素反应性乳腺癌进展重要的分子基础，但NF-kB过度激活的分子机制未明。LRP16是我们实验室发现的一个雌激素受体a反应性基因，其表达水平与乳腺癌进展密切关联。近期，我们研究组证实了LRP16与NF-kB亚单位p65之间的相互作用关系，并发现LRP16增强了TNFa刺激的NF-kB信号活性，抑制LRP16表达促进TNFa诱导的细胞凋亡，提示LRP16是调控NF-kB信号活性的辅激活因子。本项目将：1）细化研究LRP16/NF-kB转录复合体之间的相互作用，阐明LRP16调控NF-kB信号活性的分子机制；2）在雌激素反应性乳腺癌细胞中研究雌激素受体a信号通路是否通过LRP16增强了NF-kB信号的过度激活，并对这一分子联系在乳腺癌组织标本中加以验证。本项目研究的意义不仅在于识别一个新的NF-kB功能活性调控因子，更重要的是通过LRP16将雌激素与NF-kB信号联系起来。

本项目中，我们发现LRP16通过与p65相互作用参与NF-kappaB转录复合体的形成。使用RNA干扰技术抑制细胞内源性的LRP16表达可以显著降低细胞因子诱导的NF-kappaB活性及其下游靶基因mRNA表达水平。进一步的机制研究显示LRP16并不影响TNF-alpha诱导的NF-kappaB入核，但是可以影响NF-kappaB转录复合体的形成或者稳定性。此外抑制LRP16的表达可以增加细胞对于TNF-alpha诱导凋亡的敏感性。在临床组织标本的研究中，我们进行了LRP16表达水平与NF-kappaB转录活性的关联性研究，发现LRP16的表达水平与NF-kappaB的转录活性呈正相关。总之，本项目识别了LRP16在细胞因子诱导的NF-kappaB转录激活中的重要作用，与肿瘤细胞中NF-kappaB的异常激活存在密切联系。另外，我们还发现LRP16可以与PARP1等蛋白存在相互作用，并且在IKKγ的磷酸化与SUMO化中发挥重要作用，在此基础上，我们对其机制进行了深入研究，发现LRP16通过组成性的与PARP1、IKKγ、Ku70、Ku80相互作用从而介导双链DNA断裂特异性的激活NF-kappaB。因此本项目研究识别了LRP16在细胞因子和DNA损伤诱导NF-kappaB激活过程中的不同作用机制，但均十分重要，提示其在肿瘤治疗抵抗中的重要价值，下一步值得从临床角度进一步判定。