microRNAs在间质干细胞介导的急性肾损伤修复中的作用及机制研究

在间质干细胞（MSC）分离纯化、基因转染和移植治疗肾损伤模型的基础上，深入探讨MSC在急性肾损伤（AKI）修复中的作用机制，是其临床应用前亟待解决的问题。为此，本研究以microRNAs分子为切入点，从MSC移植两种经典AKI大鼠治疗模型入手，比较筛选差异表达一致的microRNAs分子，找寻并验证MSC介导的肾损伤修复中的关键microRNAs分子；经靶基因预测、荧光素酶报告基因检测等揭示关键microRNAs分子对应的靶基因及作用位点，并阐明在急性肾损伤修复中的关键信号通路；借助转基因技术，以具治疗作用的microRNAs或有拮抗作用的microRNAs的反义寡核苷酸转染MSC并移植AKI大鼠，比较转染前后MSC的肾损伤修复效果和microRNAs分子的体内功能。本项目的完成将为MSC的临床应用及基因治疗提供可靠的实验依据，为临床治疗AKI 提供新思路。

本项目在课题组有关间质干细胞（MSC）分离纯化、基因转染和移植治疗肾损伤模型的基础上，深入探讨MSC在急性肾损伤（AKI）修复中的作用及相关机制。主要以microRNAs分子为切入点，从大鼠骨髓MSC（rMSC）移植顺铂诱导AKI大鼠治疗模型入手，比较筛选差异的microRNAs分子，找寻并验证rMSC介导的肾损伤修复中的关键microRNAs分子，在此基础上阐明在MSC急性肾损伤修复中的关键信号通路。.研究结果显示，尾静脉输注后，rMSC可定位到顺铂诱导的急性肾损伤大鼠的肾脏并明显改善其功能，能减少损伤肾脏的细胞凋亡，促进肾细胞的增殖；移植三天后取不同组别的肾组织进行microRNA芯片分析（Agilent），结果显示MSC移植组与未移植组存在多个差异的microRNA分子，通过定量RT-PCR也验证了部分芯片结果；通过靶基因预测及westernblot也证实了microRNA分子调控的与肾损伤修复相关靶基因，进一步的工作还在进行中。在研究执行过程中，还进行了rMSC对血吸虫诱导的小鼠肝损伤的治疗研究，进一步揭示rMSC对损伤修复的效果。此外，关注人源脐带MSC（ucMSC）对肾肝损伤的修复及机制，进行了ucMSC对小鼠缺血再灌注肾损伤修复的机制研究，揭示了巨噬细胞在其中的作用；利用HGF修饰的ucMSC移植治疗肝损伤；通过 ucMSC来源的外切体进行了肾、心肌及肝纤维化的相关修复研究。同时，还开展了microRNA分子的相关工作，探讨了miR-17-5p/20a在胃癌中的作用，为microRNA分子研究工作提供技术平台。这些研究结果为MSC在多种损伤性疾病，特别是肾损伤修复中的作用及机制提供了新的实验依据。在一年的研究工作中，已发表相关标注的研究论文10 篇，其中SCI收录论文5篇。培养硕士研究生3名，已毕业2名；培养1名博士研究生，已毕业。