趋化因子受体CCR7在乳腺癌淋巴结转移过程中的作用和机制研究

Breast cancer is one of the most common malignancies in women, lymphatic metastasis is the major factor responsible for ineffective treatment of breast cancer. It still remains to be one of the key problems to prevent the breast cancer cells metastasizing to distinct lymph nodes for the curing of breast cancer. Recent studies have shown that CCR7 expression is tightly correlated to the lymph node metastasis of a variety of solid tumors. Our previous results also confirmed that the protein levels of CCR7 expression are high in breast cancer patients with lymph node metastasis. Further to explore the role and mechanism of CCR7 among these, we will adopt the lentiviral RNAi techniques to silence the mRNA levels of CCR7 gene, and establish breast cancer cell lines stably expressing CCR7 shRNA, and implant these cells to the mammary fat pad of NOD/SCID mice to develop the CCR7 negative/low expression mice models of breast cancer. Moreover, the regulatory effect and mechanism of CCR7 will be investigated, including the signaling pathway, biomarkers relative to tumor metastasis, anti-tumor factors and its ligand CCL21 in the tumor microenvironment during the lymph node metastasis of breast cancer. Our studies will provide more evidences for the CCR7 as a therapeutic target in breast cancer patients with lymph node metastasis.

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，乳腺癌发生淋巴结转移是导致其治疗失败的主要原因。因此，如何阻止乳腺癌细胞向淋巴结及远处转移是目前临床治疗中亟需解决的关键问题。研究表明，大多数实体肿瘤的淋巴结转移与趋化因子受体CCR7密切相关。我们前期的研究结果也表明，在乳腺癌淋巴结转移的病人中CCR7蛋白水平也有高表达。为了深入探讨CCR7在乳腺癌淋巴结转移过程中的潜在作用和机制，本项目将以CCR7为靶基因，采用慢病毒shRNA干扰技术，建立沉默CCR7基因乳腺癌淋巴结转移的乳腺癌细胞和小鼠模型，探讨在CCR7表达下调后，信号通路、与肿瘤迁移相关标记物、抗肿瘤因子以及其配体蛋白CCL21在肿瘤微环境和小鼠模型外周血中的表达变化及其内在联系，阐明CCR7在乳腺癌淋巴结转移过程中的作用及调控机制。该研究结果有望为CCR7作为乳腺癌淋巴结转移的临床治疗靶点提供理论依据。

乳腺癌是一种严重危害女性身心健康的常见恶性肿瘤，与其他亚型相比，三阴性乳腺癌的转移和复发率更高，往往预后很差，且缺乏有效的靶向治疗。乳腺癌发生远处转移是造成病人死亡的主要原因，有研究表明CC趋化因子受体7（CCR7）在乳腺癌的淋巴结转移中起着重要的作用。然而，CCR7在三阴性乳腺癌（TNBC）中的作用尚未完全阐明。在本研究中，我们发现CCR7在三阴性乳腺癌组织和细胞系中均高表达且其表达量与乳腺癌的淋巴结转移、TNM分期正相关。我们采用慢病毒shRNA干扰技术，在具有高转移性的4T1和MDA-MB-231乳腺癌细胞（两种TNBC细胞系）中，构建了稳定沉默CCR7的细胞株，发现CCR7的消耗显著降低了TNBC细胞的增殖，迁移和体外侵袭。我们还应用4T1荷瘤小鼠动物模型，首次在动物体内证实敲低CCR7的4T1细胞荷瘤小鼠的移植瘤生长减缓且体内远处转移明显减少。此外，为了阐明CCR7调控乳腺癌转移的分子机制，我们采用蛋白质谱技术系统，发掘敲低CCR7和对照4T1细胞中差异性表达的蛋白，发现EpCAM等几种蛋白可能介导了CCR7在乳腺癌转移中的功能。我们的研究结果表明，CCR7可以促进乳腺癌的生长与转移，并可能成为乳腺癌诊断和治疗的新靶点，为防治乳腺癌转移和减少乳腺癌病人死亡提供了理论依据。