熟地/淫羊藿增加和动员骨髓内皮祖细胞促心肌血管新生的作用及机制研究

应用内皮祖细胞（EPCs）促缺血心肌血管新生是治疗心肌梗死（MI）的新方法，但循环中EPCs数量过少，限制了该方法的临床应用。依据"肾生骨髓"的中医理论和前期研究结果，我们提出补肾益精填髓的熟地/淫羊藿药对可能具有增加和动员骨髓EPCs，进而促缺血心肌血管新生的假说。为验证此假说：①在骨髓移植小鼠建立MI模型，进行熟地、淫羊藿和熟地+淫羊藿干预，不同时间点检测对比各组骨髓来源EPCs的数量、分布及新生血管密度，评价药物疗效；②为排除细胞融合，在不同性别小鼠骨髓移植模型中进一步确证药物疗效；③体外分离小鼠骨髓EPCs，观察熟地、淫羊藿和熟地+淫羊藿干预对EPCs功能的影响，并应用过表达和干扰载体研究药物作用的信号通路；④回归体内，在MI模型中应用过表达和干扰载体，检测信号通路中各关键分子的mRNA及蛋白表达，从正反两方面进一步验证药物作用的分子机制。本研究将为中药治疗MI拓宽新的思路和方法。

应用内皮祖细胞（EPCs）促缺血心肌血管新生是治疗心肌梗死的新方法，但循环中EPCs 数量过少，限制了该方法的临床应用。依据“肾生骨髓”的中医理论和前期研究结果，我们提出补肾益精填髓的熟地/淫羊藿药对可能具有增加和动员骨髓EPCs，进而促缺血心肌血管新生的假说。为验证此假说：①建立大鼠心肌梗死模型，进行熟地、淫羊藿和熟地+淫羊藿干预，不同时间点检测对比各组骨髓来源EPCs 的数量、分布及新生血管密度，评价药物疗效；②体外分离大鼠骨髓EPCs，观察熟地、淫羊藿和熟地+淫羊藿干预对EPCs 功能的影响，并应用过表达和干扰载体研究药物作用的信号通路；③在MI 模型中应用过表达和干扰载体，检测信号通路中各关键分子的mRNA 及蛋白表达，正反两方面进一步验证药物作用的分子机制。研究发现：（1）具有补肾作用的熟地和淫羊藿能够通过增加/动员骨髓EPCs 的数量改善缺血心肌的血管新生；（2）熟地淫羊藿药对能通过CXCR4 和/或PI3K/Akt 信号通路动员骨髓EPCs 促心肌血管新生，改善心功能。本研究将为中药治疗心肌梗死拓宽新的思路和方法。