诱发愤怒、郁怒大鼠模型脑中枢关键指标筛选及其评价

我们及相关研究表明：愤怒和郁怒是肝疏泄失常所致主要情志异常，其异常原因与脑中枢5-羟色胺（5-HT）等相关指标密切相关，但具体哪些脑区的该类指标发生哪些变化远未明确。搞清这一问题，对于尝试揭示肝主疏泄调畅情志的脑中枢调控机制，筛选纠正愤怒郁怒情志刺激作用的治疗药物，具有重要理论意义和应用价值。本研究拟采用社会隔离配合居住入侵方法，建立诱发愤怒、郁怒情志反应的大鼠模型，应用脑微透析灌流和HPLC、放射免疫技术，进行诱发模型大鼠脑中枢不同脑区5-HT等关键指标定位和定量研究。依据研究结果，提出"肝疏泄失常与不同脑区单胺类神经递质、性激素及其调节激素异常波动有关"假说。

本课题采用社会隔离配合居住入侵方法，建立诱发愤怒、郁怒情志反应的大鼠模型，应用HPLC、放射免疫、PCR、Western Blot等技术，进行诱发模型大鼠脑中枢不同脑区单胺类神经递质及其基因蛋白表达的检测。结果表明，造模一周及两周后HA组大鼠攻击行为得分均较LA组显著上升，而攻击行为潜伏期则显著缩短，另旷场实验得分HA组较正常对照组、LA组均有显著性差异，LA组与正常对照组比较显著上升，两组（HA和LA组）糖水偏耗系数及肾上腺系数均较正常对照组显著下降；与正常对照组相比，愤怒模型组大鼠下丘脑5-HT含量显著降低，郁怒模型组大鼠额叶皮质5-HT含量显著上升而下丘脑5-HT含量则显著下降；愤怒模型组与郁怒模型组相比，大鼠下丘脑5-HT含量显著上升；与正常组相比，5-HTR2C mRNA和蛋白表达在愤怒、郁怒反应大鼠海马中均极显著性增高，上述改变在模型用药组均得到不同程度改善，基本可恢复到正常水平；与正常组相比，愤怒模型大鼠顶区皮质和额区皮质中5-HTR2C mRNA和蛋白表达均显著性升高，经前平颗粒可显著下调其异常表达；与正常组比较，郁怒模型组大鼠下丘脑5-HT3BR mRNA水平和蛋白水平都极显著性增高，愤怒组则都极显著性下降；与模型组比较，给药组均发生极显著性改善，且与正常组无统计性差异。与正常组相比，GABABR2 mRNA水平和蛋白水平在愤怒郁怒情绪大鼠下丘脑中均下降，而且愤怒组的降低程度明显大于郁怒组。与各模型组相比，模型给药组均得到不同程度的升高，与正常水平基本无差异。. 综合以上分析，可得如下初步结论：1.应用攻击行为测试、旷场实验、糖水偏好等动物行为学方法可区分大鼠情绪反应不同类型，结合情绪领域最近成果及动物行为学经验可资判别，两种不同愤怒情绪类型大鼠行为学改变类似临床愤怒郁怒人群典型改变。2.大鼠愤怒、郁怒情绪反应与下丘脑5-HT含量显著下降密切相关，其中枢机制主要与下丘脑、额叶皮质、海马5-HTR2C、5-HT3B、GABAB2受体基因及其蛋白表达异常有关。3.调肝方药干预愤怒郁怒不良情绪反应作用机制可能与其纠正下丘脑5-HT含量显著下降、不同脑区5-HTR2C、5-HT3B、GABAB2受体基因及其蛋白表达异常相关。