miR-373调控乳腺癌侵袭转移的信号通路研究

为了阐明miR-373促肿瘤侵袭转移的分子机制，我们发现miR-373的表达与转录因子Twist的调控有关，同时采用SILAC定量蛋白质组学技术发现了一个新的miR-373可能靶标基因ITGA2。.在此新发现的基础上，通过构建miR-373启动子区荧光报告基因和ChIP技术，证实miR-373的表达直接受转录因子Twist调控；通过构建ITGA2基因mRNA的3'UTR荧光报告基因，证实ITGA2是miR-373的靶标基因；通过体外侵袭转移模型和动物实验，阐明miR-373靶向ITGA2促使肿瘤侵袭转移的分子机制；最后在临床样品中获得Twist通过调控miR-373来抑制ITGA2表达而促使乳腺癌侵袭转移的证据。从而建立miR-373促使乳腺癌侵袭转移的信号通路，有助于深入理解miR-373的功能，和从miRNA这个新的角度理解肿瘤侵袭转移的机制。

在此国家自然科学基金的资助下，我们圆满超额完成了计划书原计划的研究内容和研究目标。我们比较了ITGA2在有无淋巴结转移的乳腺癌组织、癌傍非肿瘤乳腺组织和淋巴结转移组织的表达变化，发现ITGA2的水平在乳腺癌组织中下调，但在淋巴结组织中得到部分恢复，并且ITGA2的水平在淋巴结阳性的乳腺癌组织原低于在淋巴结阴性的乳腺癌中的水平。令人感兴趣的是，我们发现在肿瘤组织和细胞中，ITGA2的蛋白质水平下调的幅度远远大于其在mRNA的水平上的下调幅度。进而我们证实miR-373通过直接结合ITGA2的3’UTR区抑制其mRNA的翻译。下调的ITGA2可以促使细胞－细胞粘附消失，细胞骨架解聚和迁移能力下调，类似于miR-373过表达的效应。在临床样品中我们进一步证实，miR-373的水平在淋巴结阳性的乳腺癌组织高于淋巴结阴性的乳腺癌组织。ITGA2的蛋白质水平与miR-373的水平呈负相关。MiR-373-ITGA2的活化可以用来预测肿瘤的侵袭转移。为了回答miR-373为什么在肿瘤中上调，我们发现TWIST可以直接结合miR-371-373的启动子区，而调控miR-373的表达。在本项目的资助下，已经发表第一作者或者通讯作者SCI论文7篇，参加国际、国内肿瘤相关学术会议9次，培养硕士研究生5名。