抗MPB64-McAb INH、RFP聚乳酸纳米粒靶向治疗脊柱结核的实验研究

有效的抗结核化疗是脊柱结核治疗的核心，提高抗痨药的靶组织分布对治愈脊柱结核有极其重要的价值。一线抗痨主药INH、RPF由于自身结构和药物动力学特点，其常规剂型很难在脊柱结核病变区长期存留和有效渗透，难以维持有效的药物浓度而影响化疗疗效。为克服传统抗痨药物剂型的不足，本研究拟采用现代纳米技术与抗体技术手段，构建新型的包被抗结核分枝杆菌特异性抗原MPB64单克隆抗体及异烟肼和利福平的聚乳酸纳米粒载药系统，通过体外释药动力学、体内药代动力学及对兔脊柱结核模型治疗的研究，探索该纳米药在脊柱结核病椎中的靶向性及穿越病椎骨髓-血屏障的转运机制，同时观察其靶向治疗兔脊柱结核的效果。此研究对于单纯应用化疗药物高效、快速治愈脊柱结核，提高化疗依从性，降低药物毒副作用有重要意义，为临床应用靶向抗结核化疗治愈脊柱结核提供一种新的思路。

本研究采用现代纳米技术与抗体技术手段，成功构建了新型的包被抗结核分枝杆菌特异性抗原MPB64单克隆抗体及异烟肼和利福平的白蛋白聚乳酸纳米粒载药系统，顺利完成该药物的体外释药动力学、体内药代动力学及其对兔脊柱结核模型治疗的研究。项目取得的研究成果如下：1.成功获得快速、大量合成高纯度的抗MPB64单克隆抗体及阳性克隆细胞株。2.成功制备偶联抗MPB64 单克隆抗体的 INH RFP复合免疫载药纳米粒，即抗MPB64McAb INH RFP白蛋白纳米粒，体外证实该纳米粒具有良好的释药特性。3.研究证实抗MPB64 McAb INH RFP白蛋白纳米粒具有较高的兔骨组织的靶向分布和良好的体内缓释作用。4.兔脊柱结核模型注射抗MPB64McAb INH RFP白蛋白纳米粒临床观察显示，一周1次低剂量的纳米药物可以达到良好的病椎靶向分布和治疗作用，疗效优于常规治疗组（针剂注射每日1次）。纳米药物在脊柱结核病灶内外均有较高的杀菌浓度。我们所构建的抗MPB64单克隆抗体INH RFP白蛋白纳米药具有给药次数少、给药剂量低、体内骨组织靶向分布高的优点，能够穿过骨髓-血屏障、靶向分布病椎、高效杀菌起到靶向治疗兔脊柱结核的作用。临床观察显示其治疗兔脊柱结核的治疗效果要明显优于传统抗结核药物剂型。由于剂量小、给药次数明显减少，毒副作用低，因此大大提高了化疗依从性，从理论到实践均为临床应用靶向抗结核化疗治愈脊柱结核提供了一种可行的全新思路和技术方法。