腺病毒载体介导外源人FVIII基因真核高效表达体系构建

本研究建立复制缺陷型腺病毒载体基因转移系统，并介导人FⅧcDNA至离体和活体，获得高水平的转移和表达。为降低腺病毒在体内的免疫原性，本研究还在本课题基础上，构建了一种含hⅧcDNA的辅助病毒依赖型腺病毒载体，并按常规方法，感染离体细胞和动物，获得预期结果。从而在国内探讨一条能稳定表达人FⅧ蛋白的基因转移载体系统，为血友病A的治疗创造了条件。本研究还在此基础上，以重组质粒为外源基因表达质粒，在小鼠体内初步比较了Pluronic和Bupivacaine及其联合应用对外源基因在肌内表达量影响。研究表明该辅助剂能增加经肌肉局部注射的表达质粒中外源基因表达量。