孕期炎症刺激致胎鼠与子代大鼠肾素-血管紧张素系统的印迹效应及其机制研究

"胎儿起源的成年疾病" 是近年研究妊娠因素影响胎儿健康的热点。我们研究发现孕期炎症刺激可导致子代大鼠发生高血压，提出了"原发性高血压的形成应追溯到孕期炎症刺激"的新观点，得到了国际同行的肯定，但机制亟待阐明。结合新近文献和前期研究，我们提出假设：孕期炎症刺激可能通过升高宫内炎症因子水平影响胚胎DNA表观遗传修饰模式，导致关键基因表达异常，从而诱发高血压发生。肾素-血管紧张素系统（RAS）机制是高血压病发病的主要机理。本项目拟在成功创建子代高血压模型的基础上，检测胎鼠及子代大鼠脑和肾脏组织RAS基因的表达水平，同时检测异常表达RAS基因的启动子甲基化程度、炎症因子及DNA甲基转移酶的表达水平，并结合NF-κB抑制剂PDTC等孕期干预的比较研究，探讨孕期炎症刺激致子代高血压大鼠RAS基因的印迹效应及其机制。该项目开展不仅可以了解高血压发生的关键环节，也可为寻找高血压新的有效防治途径提供线索。

目的：以孕期炎症刺激致子代大鼠高血压为模型, 探讨孕期炎症刺激致子代大鼠高血压的发生机制，以及维生素C（VC）和维生素E（VE）是否可防止子代大鼠高血压发生。方法：怀孕SD大鼠按照随机数字表的方法随机分为5组，正常对照组： LPS模型组、LPS+PDTC组、LPS+VC组、LPS+VE组。对子代大鼠体重、血压、血浆血管紧张素浓度、相关基因表达量等指标进行检测。结果： 1）LPS模型组血压、体重明显高于正常对照组，而VC、VE与PDTC干预均能显著逆转LPS所导致的血压升高和体重增加。2）孕期暴露于LPS的子代大鼠肾脏组织中IL-6、Fli-1、DNMT1、DNMT3B的mRNA的表达在实验组较对照组显著升高(P＜0.05)，PDTC干预后可以逆转IL-6、Fli-1、DNMT1、DNMT3B的变化。3）发现孕期暴露于LPS可导致子代大鼠肾皮质中部分基因发生异常表达。ACE在6周和12周时表达显著提高，6周时PDTC、VE处理可逆转，12周时PDTC、VC、VE处理均可逆转。AGT在6周和12周时表达显著提高，6周和12周时PDTC、VC、VE处理均可逆转。AT1a、AT1b在6周和12周时各组间表达无显著差异。4）在6周和12周时，孕期暴露于LPS的子代大鼠肾皮质ACE启动子区的CpG岛甲基化程度与对照组子代大鼠相比均无显著差异。根据ChIP检测结果，首次发现孕期暴露于LPS可导致子代大鼠肾皮质ACE启动子区的组蛋白H3乙酰化富集程度在6周和12周时显著提高，而PDTC和VC处理均可减少启动子区组蛋白H3的乙酰化富集程度。结论：1)孕鼠用脂多糖处理后，出现子代大鼠血压增高、体重增加，VC、VE与PDTC干预均能逆转LPS所导致的血压升高和体重增加。2)用LPS对孕鼠进行刺激可以引起子代大鼠肾脏组织DNMT1、DNMT3B表达增高，PDTC进行干预可以逆转DNMT1、DNMT3B的表达水平，提示了DNA甲基化可能参与了孕期炎症刺激引起子代成年高血压的发生机制。3)发现孕期暴露于LPS可导致子代大鼠肾皮质中ACE基因发生异常表达机制可能与其启动子区域组蛋白H3乙酰化富集有关，而可能不是由于启动子DNA甲基化程度变化引起。.