小鼠子宫内膜胚胎着床点microRNAs的表达及其对胚胎着床的调控作用

胚胎着床是妊娠成功的关键环节，这一复杂的生殖过程涉及诸多因子的参与和协同作用，但其机制尚不清楚。现已证实miRNA在许多生命活动中发挥着重要的调控作用。新近，有研究提示：miRNAs可能参与了胚胎着床的调控，我们的预实验也支持这一设想。基于此，本研究采用miRNA芯片和基因芯片技术对妊娠小鼠子宫内膜胚胎着床点及其旁组织miRNA的表达和基因表达进行分析，筛选着床相关miRNA，并结合基因表达谱数据，运用生物信息学miRNA靶基因预测算法预测着床相关miRNA所调控的靶基因，并对此加以验证。此外，利用microRNA高效阻断剂Antagomir对所筛选的着床相关miRNA进行体内功能实验，探索其对胚胎着床的影响，从而更深入地认识miRNA在胚胎着床过程中的调控作用。

课题于2011年1月启动，并于2013年10月完成了合同任务书要求的全部研究内容，并新增了部分实验研究。.按照计划书内容，我们利用芯片技术构建了小鼠妊娠窗口期（孕5天）子宫内膜着床点及其旁组织的miRNA表达谱和基因表达谱，得到着床点上调的30个miRNAs和下调的42个miRNAs。利用生物信息学miRNA预测算法结合基因表达谱数据，得到miRNA在小鼠子宫内膜中的潜在靶基因。并通过体外转染实验，证实了miRNA对预测靶基因的调控和基质细胞的作用。通过体内功能实验，证实了miRNA参与调控胚胎着床。.新增实验包括①原位杂交实验：对miRNA在小鼠子宫内膜进行定位，以便预测其功能；②荧光素酶报告基因实验：证实miRNA与预测靶基因的靶向关系；③利用数据库GO和KEGG对负相关靶基因进行了功能和信号通路预测，以探讨miRNA可能的作用机制；④对miRNA及预测靶基因进行了负调控网络图绘制，以得到在胚胎着床中起关键作用的miRNA。.综合所有实验结果，查阅相关文献资料，我们得到如下结论：miRNA参与调控胚胎着床，其分子机制主要涉及细胞粘附和免疫相关信号通路。. 以上成果已撰写SCI论文3篇, 1篇发表在PLOS ONE，2篇发表在Reprodutive science，1篇在投