miR-192与肝细胞癌复发转移预后的关系及其机制研究

Liver cancer is one of most common malignancy worldwide.The prognosis is extremely poor due to low diagnostic rate at early stage and recurrence/metastasis after clinical intervention. Our team found a MicroRNA panel from the plasma of hepatocellualar Carcinoma (HCC) patient could diagnose Hepatitis B-related HCC at early stage previously.And we also investigated the expression of these panel MicroRNAs in HCC tissues based on 252 microarray data.The survival analysis upon 10-year follow-up of HCC patients after surgical treatment revealed miR-192 has a significant favorable correlation with recurrence-free survival.As well we figured out NF-κB,Erk1/2,JNK,Histone,HDL,LDL are the target genes of miR-192 via the analysis of 238 mRNA microarray of HCC tissues。 Here we plan to (1)design experiments in vitro and in vivo to validate miR-192 functionally; (2)determine the major pathways and target genes regulated by miR-192 using bioinformatic tools such as IPA, TargetScan and validate these genes and pathways in vitro and in vivo experiments. This is the first study which demonstrate the correlation between expresion of miR-192 in HCC tissue and HCC prognosis after surgical resection. We also aim to further investigate how miR-192 functionally effect the recurrence/metastasis of HCC from this study which may reveal new targets for molecular intervention for HCC patients.

肝癌是最常见的恶性肿瘤之一，早期诊断率低，术后易复发转移，预后极差。针对现状，我们课题组前期已发现一组肝癌患者血浆中的MicroRNAs能诊断早期乙肝相关性肝癌，同时我们利用本研究所已完成的252例肝癌组织MicroRNA芯片数据检测了这些MicroRNAs在癌组织中的表达水平，结合术后随访数据发现miR-192与肝癌术后无瘤生存率呈显著正相关；并通过本所已有的238例肝癌组织表达谱芯片确定了NF-κB，Erk1/2，JNK，Histone，HDL，LDL是可能的靶基因。因此本课题拟设计体内外实验观察miR-192对肝癌细胞复发转移行为的影响；利用常用生物信息数据库对初步确定的靶基因进行验证和补充；进一步设计实验明确miR-192发挥功能所依赖的信号通路。本课题研究不仅首次明确肝癌组织miR-192表达水平与肝癌预后的关系，且将进一步阐明其影响肝癌复发转移预后的主要机制。

肝癌是目前全世界最常见的恶性肿瘤之一，起病隐匿、预后差。复发转移是降低肝癌患者术后生存率的最重要因素。经过多年研究，MicroRNA在肿瘤发生发展过程中发挥的作用已被证实是明确且十分重要的。因此对影响肝癌复发转移的miRNAs进行探索并分析其具体功能，找到新的潜在干预靶点，有望为肝癌术后抗复发治疗提供新的手段，进而提高疾病疗效。本课题研究明确了前期工作中感兴趣的目标miRNAs（miR-192和miR-29a）在肝癌及癌旁组织中的表达情况以及与肝癌患者预后的关系，发现肝癌组织中miR-192表达水平低于癌旁组织，而肝癌组织中miRNA-29a的表达水平则低于癌旁组织。分析肝癌患者预后，认为肝癌中miR-192表达与肝癌预后呈正相关，miR-29a与肝癌预后呈负相关，提示在肝癌转移过程中miR-192可能发挥抑制作用而miR-29a则可能发挥促进作用。功能研究中，课题组在体内及体外实验中观察了miR-192和miR-29a表达对肝癌细胞株转移潜能、裸鼠体内原位成瘤和转移成瘤能力等的影响，并通过上调或下调目标miRNAs表达后，继续观察和比较体内外实验中肝癌细胞转移能力的变化。该部分功能研究的结果确认了miR-192的抑癌作用和miR-29a的促癌作用。课题组进一步探索了miR-29a和miR-192影响肝癌复发转移的通路，发现miR-29a通过沉默TET（ten eleven translocation）-Family-SOCS1（suppressor of cytokine signaling 1）-MMP9 (matrix metalloproteinase9) 轴促进肝癌转移复发；miR-192通过影响NF-κB（nuclear factor kappa B）和ERK（extracellular regulated protein kinases）通路抑制肝癌复发转移。本课题研究明确了miR-192、miR-29a对肝癌复发转移的影响，揭示了肝癌中miR-29a发挥促癌作用的主要途径，并探索了miR-192影响肝癌预后的可能通路，为其进一步进行实验干预提供了理论依据，为临床应用奠定了基础。