激动心肌内向整流钾通道的抗心律失常作用观察

许多病理状态下心律失常的发生与心肌内向整流钾通道（Kir2）功能下调有关，然而，迄今还没有一种抗心律失常药是将Kir2作为主要靶点的。前期研究我们发现，Zacopride（扎考比利）很可能是Kir2的选择性激动剂。本研究利用全细胞膜片钳技术，首先检测它对兔心肌与动作电位相关的主要离子流IK1、IK 、Ito、ICa-L、INa、INa/Ca、Ipump等的作用，以进一步证实其对心肌Kir2的选择性激动作用。在此基础上，利用全细胞膜片钳和细胞内钙测定技术，通过建立心肌缺血、再灌注、乌头碱、洋地黄等因素诱导的在体和离体灌流心脏的心律失常模型，及单细胞延迟和早期后除极模型，检测Zacopride对心律失常的作用及其机制，并进一步分析它激动Kir2的机制。本研究旨在证实激动Kir2具有抗心律失常的作用，该项目的完成，将为抗心律失常提供一种全新的策略，并为今后抗心律失常药物的研发提供新的思路和方向。

许多病理状态下（心力衰竭、心肌缺血等）发生的心律失常与心肌内向整流钾通道（Kir2）功能下调有关，然而，迄今还没有一种抗心律失常药是以Kir2作为主要靶点的。本研究综合运用全细胞膜片钳技术、Langendorff离体心脏灌流技术、在体心功能检测、Western blot等多种方法，首先观察了Zacopride对兔心肌与动作电位相关的主要离子流IK1、IK、Ito、ICa-L、INa、INa/Ca、Ipump等的作用，并进一步分析了其作用机制；通过建立心肌缺血-再灌注、乌头碱、哇巴因等诱导的多种在体和离体灌流心脏的心律失常模型，及心室肌细胞延迟和早期后除极模型，检测了Zacopride对心律失常的作用，并对其机制进行了分析。结果表明：（1） zacopride（0.1-10 µmol/L）对IK1具有浓度依赖性激动作用，在此浓度范围内，zacopride对ICa-L、INa、INa/Ca、Ito、IK、IK，tail和Ipump均无明显作用。（2）Zacopride选择性激动IK1的作用不是经5-HT3受体和5-HT4受体介导，而是受AC-cAMP-PKA信号转导系统调节。（3）zacopride（在体1-10 μg/kg；离体0.1-10 μmol/L）浓度依赖性地抑制兔在体和离体缺血-再灌注性、哇巴因和乌头碱等多种因素诱发的心律失常，表现为总心律失常持续时间缩短，室速、室颤发生率和持续时间均降低，且这一抗心律失常作用可被1 μmol/L BaCl2大部消除。（4）在药物诱发的兔心室肌细胞早期和延迟后除极模型，1 μmol/L zacopride可有效抑制早期和延迟后除极的发生。（5）zacopride（0.1-10 μmol/L）能够增大兔心室肌细胞静息膜电位，缩短动作电位时程，且该作用与其激动Kir2有关。综上，本研究首次证实了Zacopride对兔心肌Kir2 的选择性激动作用，并阐明其作用机制与AC-cAMP-PKA信号转导通路有关；在此基础上，在整体动物和离体心脏多种心律失常模型证实了激动心肌Kir2 具有抗心律失常作用，其机制与zacopride激动Kir2、增大心室肌细胞静息电位、抑制心室肌后除极有关。本研究结果为激动Kir2抗心律失常这一新的抗心律失常策略提供了实验依据，并为今后抗心律失常药物的研发提供了新的思路和方向。