基于方证相应理论研究葛根芩连汤功效成分在RV感染小型猪选择性吸收的特性

Gegen Qinlian decoction is a classical prescription recorded by Zhang Zhongjing. As it can relieve exterior syndromes, clear interior heat, and regulate intestine and stomach perfectly, it has been preferentially used in clinic for the treatment of rotavirus (RV) infectious diarrhea. Infectious diarrhea can cause the disorder of bowel function and have adverse effect on the intestinal absorption Preliminary efficacy research has confirmed that the prescription perform well at antipyretic, antidiarrheal and anti-inflammatory. Therefore we speculate that the RV infected intestinal selectively absorb and distribute the efficacy components. Under the guidance of Correspondence of Prescription and Syndrome theory, we try to determine the efficacy components and research the influencing factors of the effective substance's absorption characteristic in the normal and RV infected minipigs by using PK-PD model. Through the study,we hope to reveal the treatment of Gegen Qinlian decoction and provide basis for Correspondence of Prescription and Syndrome theory ,new dosage forms design and new digestive tract drug research.

葛根芩连汤为张仲景的经典方剂，有解表清里、升清止利之功，用于协热下利证，病-证对应，现已成为治疗轮状病毒（RV）感染性腹泻的首选方剂。但感染性腹泻可引起肠功能的紊乱，对肠道吸收产生不利影响。"葛根芩连汤配伍规律"研究证实全方解热、止泻、抗炎等综合效果最好，临床证明其疗效突出，起效快，由此推测RV感染肠道病理状态对其功效成分产生了选择性吸收及分布。据此，本项目以中医"方证相应"理论为指导，首次在RV感染小型猪模型上，通过PK(血液、肠液)-PD相关性研究，明确葛根芩连汤主要功效成分，并研究功效成分在生理及RV感染小型猪病理肠道吸收特性，进一步揭示葛根芩连汤方药治病内涵，为"方""证"相应理论、消化道疾病中药新剂型的设计及新药研究提供依据。

本项目从协热下利证对葛根芩连汤（GQD）主要功效成分吸收影响的角度，探究“证”对“方”的作用。主要研究包括病理模型的建立、GQD的药动学（PK）、药效动力学(PD)和影响功效成分肠道吸收机制。主要研究结果：（1）首次建立了大肠杆菌（E-coli）感染哺乳期西藏小型猪腹泻模型并成功用于PK和PD研究，该模型与葛根芩连汤证“病-证”对应，具有推广价值；（2）通过比较生理和病理的PK参数，发现病理模型显著改变君药葛根和臣药黄芩的吸收特征，增加了葛根素、大豆苷、大豆苷元、黄芩苷、汉黄芩素的达峰浓度和葛根素、汉黄芩素的AUC0-t，以上成分的吸收增加有利于疾病的转归；（3）PD研究结果表明GQD具有显著的抗炎、抑菌作用，与PK结果进行相关性分析，葛根素和黄芩苷与抗炎作用高度相关，而生物碱类成分有可能是在肠道发挥抑菌和局部抗炎作用，达到“清热于里”的功效；（4）比较病理和生理状态下GQD主要功效成分在空肠、回肠的吸收差异，发现病理状态下葛根素、大豆苷、大豆苷元和黄芩苷在病理状态下更易透肠吸收；在肠黏膜孵化实验中，病理状态下葛根素和大豆苷、黄芩苷代谢变慢，在肠道的局部浓度高于生理状态，由此提示GQD的PK参数变化是功效成分在生理和病理状态下，肠道吸收、代谢不同影响的。（5）综合PK、PD、肠吸收、代谢数据分析，推测病理状态下小型猪E-coli腹泻会改变肠道吸收特性和代谢酶活性，这些改变可促进葛根素和汉黄芩素的吸收，增加了大豆苷、大豆苷元和黄芩苷的血药浓度，有利于这些功效成分发挥药理作用，对疾病治疗产生积极作用。研究意义：本研究根据方证相应理论，建立与“协热下利证”病-证对应的模型，通过PK-PD相关性研究，初步明确了GQD解表、清里主要功效成分群，阐明了病理状态对功效成分肠道代谢、转运机制，进一步揭示GQD方药治病内涵，为方证相应理论、中药新药研究提供依据。