特异性miRNA表达谱在职业苯中毒白血病防控中的意义

职业苯中毒所致白血病是我国职业性肿瘤中最常见的恶性肿瘤，寻找早期、敏感而特异的生物标志物，是苯暴露风险评估及危险度管理的关键。本研究利用高通量技术研究职业苯暴露工人和职业性慢性苯中毒患者血淋巴细胞miRNA特异性表达谱，筛查出不同人群中与苯暴露或苯中毒相链接的差异表达miRNA；应用氢醌诱导永生化淋巴细胞恶性转化的细胞模型，观察细胞恶性转化过程中miRNA的动态改变；对体内外变化一致的miRNA进行功能性研究，观察不同表达质粒对苯代谢、DNA损伤修复、细胞增殖等细胞生理功能的影响，分析特征miRNA在苯致癌过程中的作用及其调控规律，明确其作用的关键靶点。最后在职业苯暴露人群中进一步验证候选miRNA作为苯暴露及损害生物标志物的可行性。本研究从分子细胞水平到人群研究，探寻miRNA表达改变作为新型生物标志物应用于人群暴露监测、健康效应评价的证据，为防控苯中毒白血病发生提供有效的生物监测指标。

苯作为一种重要的化工原料，既是职业毒物，也是环境污染物。我国职业性慢性苯中毒发生率居高不下，职业苯接触导致的白血病发病率逐年上升，阐释苯的血液毒性并积极寻找苯中毒致白血病的早期生物标志具有重要的现实意义。小分子RNA(miRNA)作为表观遗传调控模式的重要组成部分，其表达异常所导致的靶细胞遗传损伤是目前化学物致癌机制研究的重要方向。围绕本课题寻找miRNA差异表达谱在职业苯暴露中的意义，我们主要从（1）体外细胞模型的构建和应用；（2）职业苯暴露的流行病学调查两个方面展开了研究。.我们首先利用本课题组前期建立的体外细胞永生化技术平台，将构建的猿猴肾细胞病毒(simian virus,SV40)Large T (SV40LT)质粒导入至健康人外周静脉血淋巴细胞，建立了一株可稳定传代的恶性淋巴细胞株，并且发现DNA损伤修复基因缺陷细胞株在化学物作用下容易出现细胞微核；致癌物诱导细胞的恶性转化伴随着表遗传基因表达的改变，且表遗传(DNA甲基化、miRNA表达)改变与体外细胞遗传损伤(细胞微核率形成、彗星拖尾)程度相关。.职业性苯暴露流行病学调查发现，较长期(5年以上)的低浓度混苯暴露工人的心血管功能及血常规平均数检测尚未出现显著差异，但长期苯暴露可使外周血白细胞计数平均值降低。苯暴露不仅影响肝功能指标，而且可能与环境噪声和个体因素(饮食习惯、体质指数等)联合作用，增加了脂肪肝发生的风险；根据上述体外细胞实验结果，我们对440名苯暴露工人及无苯接触的工人110名进行调查，两组工人血常规各项指标差异无显著性。但是苯暴露组工人外周血淋巴细胞双核微核率及彗星拖尾均较对照组工人升高(P<0.01)。虽然苯暴露组工人血淋巴细胞中多个miRNA表达量较对照组显著下调，且发现这些表观遗传分子表达的下调与遗传损伤相关，但体外细胞实验结果与人群调查结果并不一致，提示苯暴露后体内生物学的调控过程可能与体外细胞有较大差异，需要进一步深入探讨。.通过体外细胞模型和现场人群调查研究，结果提示表遗传分子(特异基因甲基化、miRNA表达谱)可能成为职业苯暴露人群健康监护的早期生物标志。