骨桥蛋白选择性剪接在肝癌侵袭转移中的作用及其机制

Alternative splicing of genes is essential for regulating gene expression and contributing to functional complexity.Osteopontin (OPN), a secreted phosphoglycoprotein, is a promoting factor for tumorigenicity and metastasis of cancer cells in several types of tumors through a variety of mechanisms. Our previous studies demonstrated that OPN played a crucial role in hepatocellular carcinoma (HCC) metastasis. In HCC, increased OPN levels are associated with metastasis, poor prognosis, and early tumor recurrence. Three OPN isoforms (OPN-a, -b and -c) derived from alternative splicing are known to exist, but their functional specificity on HCC metastasis and prognosis is not clear yet and deserves further investigation. Based on the present study, we further construct the expression profile of OPN isoforms in HCC correlated with specific cellular phenotypes and tumorigenicity of HCC and research the molecular interation between proteins with OPN isoforms using molecular biology techniques such as Co-IP, et al. It would be great help for the molecular prediction of metastases, recurrence, and prognosis in hepatocellular carcinoma.

选择性剪接在基因组中广泛存在，越来越多的研究显示,与肿瘤发生发展密切相关的癌基因、抑癌基因、肿瘤转移基因等均可发生选择性剪接，从而影响肿瘤进程。骨桥蛋白（Osteopontin,OPN）是一种分泌型的磷酸化糖蛋白，参与多种恶性肿瘤的发生和转移。人OPN通过选择性剪接产生三种剪切体，其功能与机制尚不清楚。我们前期研究发现OPN在肝癌侵袭转移中发挥重要作用，可作为预后指标和干预靶点，并初步发现三种剪接体在肝癌的发生发展中可能扮演不同的角色。本项目拟在前期研究的基础上，系统解析肝癌侵袭转移过程中OPN选择性剪接产生的三种剪接体的动态变化规律及其功能差异，绘制三种剪接体蛋白作用网络，揭示不同剪接体调控上皮间质转分化(EMT)进而影响肝癌转移的分子机制。本课题的研究对进一步阐明OPN在肿瘤转移复发中的重要功能奠定基础，同时为肝癌转移复发的分子分型预测和干预提供强有力的证据。

骨桥蛋白（Osteopontin,OPN）是一种分泌型的磷酸化糖蛋白，参与多种恶性肿瘤的发生和转移。人OPN通过选择性剪接产生三种剪切体，其功能与机制尚不清楚。我们前期研究发现OPN在肝癌侵袭转移中发挥重要作用，可作为预后指标和干预靶点。本项目在前期研究的基础上，系统解析肝癌侵袭转移过程中OPN选择性剪接产生的三种剪接体的动态变化规律及其功能差异，揭示OPN调控上皮间质转分化(EMT)、免疫微环境和肿瘤干细胞进而影响肝癌转移的分子机制。在前期研究基础上，本课题发现在HCC中，存在OPN三种剪切体形式，且OPN不同剪切体表达存在差异。OPN-a（全长）表达水平明显高于其他两种形式的剪切体。OPN-a（全长）通过调控Vimentin诱导肝癌细胞发生EMT，通过调控PI3K/AKT/Twist通路、上调CCR1促进肝癌侵袭转移促进肝癌侵袭转移。IL-6 通过上调 OPN 促进肝癌细胞干性、侵袭、转移能力及上皮-间质转化，进而促进肝癌的进展和转移。联合血浆 IL-6 与 OPN 水平可更好地预测 HCC 患者预后。OPN通过招募并激活磷酸激酶MAPK1，促进β-Catenin S675磷酸化及其细胞核转运，促进肝内胆管癌侵袭转移。而且OPN促进巨噬细胞的趋化和M2型极化以及上调HCC细胞免疫检查点PD-L1的表达。 阻断CSF1/CSF1R通路靶向TAM联合免疫检查点PD-L1抗体疗法具有协同抗OPN高表达肝癌效果。OPN 通过影响DNMT1的蛋白稳定性，调控肝癌CSCs的干性。OPN高表达的CSCs对DNMT1的抑制剂5 Aza的更敏感。本课题的研究对进一步阐明OPN在肿瘤转移复发中的重要功能奠定基础，同时为肝癌转移复发的分子分型预测和干预提供强有力的证据。. 本课题发表标注该基金资助的SCI论文5篇，其中IF>5的2篇。另外，一篇标注本基金资助论文已被Gastroenterology（IF=18.392）修回，另一篇论文已在Oncogene（IF=7.519）送审。培养博士生3名，硕士生1名。研究团队中1人获上海市杨帆计划，1人获上海市优秀博士论文。4次国际、国内学术会议作特邀报告。课题负责人去美国MD Anderson进行合作研究一年多。