TCDCA对糖皮质激素受体介导基因组学信号转导通路的影响

申请者在前期研究中，揭示了体内活性物质牛磺鹅去氧胆酸（TCDCA）具有显著的抗炎与免疫调节作用，发现了TCDCA在低浓度时就能够竞争性的与大鼠肝脏组织中的糖皮质激素受体（GR）发生结合。本课题旨在继续深入探讨TCDCA的抗炎与免疫调节作用的分子机制，寻找TCDCA治疗佐剂性关节炎（AA）的科学依据。拟以大鼠AA为模型、利用其成纤维样滑膜细胞，采用荧光偏振、Western blot和荧光定量PCR等技术揭示：①TCDCA与GR的相互作用；②TCDCA对GR基因转录活性的影响；③TCDCA对GR介导的抗炎基因表达的影响；④TCDCA分别对GR与AP-1、NF-κB及粘附分子相互作用的影响。通过该研究可为动物和人类治疗类风湿性关节炎提供新的线索，为研究抗炎免疫药物新的作用靶点提供实验基础；并对于加快TCDCA转化成医药产品，提高动物胆汁的附加值和利用率，促进畜牧业的发展具有重要的现实意义。

本研究旨在阐明TCDCA对糖皮质激素受体（GR）介导基因组学信号转导通路的影响。通过分析TCDCA对GR和热休克蛋白（HSP90）表达量及活性的影响，研究了TCDCA与GR的相互作用；分别从基因和蛋白水平探讨了TCDCA对AA大鼠滑膜组织及成纤维样滑膜细胞（FLS）中GR介导的抗炎作用的分子机理；通过进一步分析TCDCA对 AA大鼠FLS 中GR与AP-1、NF-κB抑制性蛋白（IκB）、ICAM-1及血管细胞粘附分子-1（VCAM-1）表达的影响，揭示了TCDCA作为动物的内源性物质，在体内发挥抗炎免疫调节的作用机制。结果表明，TCDCA能够与大鼠GR发生竞争性结合并诱导其核转位；显著增强GR活性并通过GR受体诱导HSP90表达及活性降低；对GR介导的AA大鼠中LC-1有显著地促进作用，但对cPLA的活性则有抑制作用；显著抑制AA大鼠FLS中AP-1、IκBα、ICAM-1和VCAM-1的表达及活性。结论：TCDCA能够与GR结合增强其活性，并通过激活GR进一步调节AA大鼠FLS中LC-1 、 cPLA2 、AP-1、IκB、ICAM-1及VCAM-1基因和蛋白水平的表达量，从而发挥发挥抗炎免疫调节作用。