牛磺鹅去氧胆酸对糖皮质激素受体介导的非基因组学信号通路的影响

Glucocorticoids(GCs) are a class of steroid hormones and its secreted by the adrenal gland. It has significantly anti-inflammatory and immunomodulatory effects. A major molecular mechanism of its physiology and pharmacology effects are genomic and non-genomic effects, but so far the non-genomic mechanism of GC is unclear. Previously our research found that TCDCA play a role in the regulation of anti-inflammatory and immune and can be competitive binding with GR of low concentrations. Therefore in order to explore the anti-inflammatory and immune regulation mechanism of TCDCA, our projects used Freund’s complete adjuvant (FCA) to induce AA in rats, observed the effect of TCDCA on the expression and activity of GR, HSP90, signal molecules,LC-1 and so on by use of fluorescence polarization(FP) , RT-PCR, Western blot and so on.

糖皮质激素(glucocorticoids，GCs)是由肾上腺分泌的一类甾体激素，具有显著地抗炎和免疫调节作用。研究发现其生理和药理作用的主要分子机制是基因组学和非基因组学效应，但关于GCs非基因组学机制还尚不清楚。本实验室前期研究发现，牛磺鹅去氧胆酸（TCDCA）具有显著的抗炎与免疫调节作用，且能够在低浓度时与GR发生竞争性结合。因此，本研究拟以大鼠AA为模型，采用荧光偏振、Western blot和荧光定量PCR等方法检测TCDCA对GR介导的非基因组学信号通路的影响，分析其对GR、热休克蛋白90、相关信号分子及脂皮素1等活性及表达量的影响，进一步探讨了TCDCA的抗炎与免疫调节作用的分子机制。

牛磺鹅去氧胆酸（TCDCA）作为动物胆汁的主要有效成分之一，具有显著的抗炎与免疫调节作用，并首次发现TCDCA对AA模型大鼠具有治疗作用。为了深入探讨TCDCA的抗炎与免疫调节作用的分子机制，寻找TCDCA抗佐剂性关节炎（AA）作用的药理学基础，本课题以AA大鼠为研究对象，观察了TCDCA对GR介导的非基因组学信号通路的影响。研究结果显示，TCDCA能够在较低浓度范围内与GR发生竞争性结合，促进GR核移位，提高AA模型大鼠FLS GR和HSP90的表达。同时还发现，TCDCA能够抑制AA模型大鼠FLS中GR相关信号分子Src和Lck的表达，提高Src的活性和Fyn的表达。TCDCA能够通过提高PLC的活性，增加IP3和细胞内Ca2+的浓度，抑制炎症介质PGE2和LTB4的分泌合成，降低细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6的浓度。通过加入GR特异性阻断剂RU486预处理，初步研究证明了TCDCA发挥抑制炎症介质和细胞因子的作用是由GR所介导的，但GR并不是TCDCA发挥其生物学效应唯一的作用靶点，有待进一步研究。项目研究部成果可为临床上开发新的治疗类风湿性关节炎的药物作用靶点提供重要的理论依据。