鲈鱼PEPCK基因启动子的克隆及其PPARγ应答元件的鉴定

鲈鱼是我国重要的海水养殖鱼类，但是鱼体内沉积的大量脂肪组织是目前影响养殖成本和产品质量的制约因素，本项目将从PPARγ对磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶PEPCK的作用着手,研究鲈鱼脂肪代谢调控的分子机制。首先用RACE方法克隆PEPCK基因cDNA序列,用步移技术克隆鲈鱼PEPCK基因启动子序列，通过pGL3-PEPCK荧光素酶双报告基因分析系统和EMSA技术确定PPARγ与PPRE之间的相互作用,初步阐明鲈鱼PEPCK基因的转录调控机制，为确立PPARγ是否参与鲈鱼脂肪代谢的调控提供科学依据。项目的完成有望初步揭示鲈鱼PPARγ作为鲈鱼脂肪代谢的调控基因的分子机制，为今后筛选和培育脂肪含量低的优质鲈鱼品种的奠定理论依据。