Period2基因调控人胶质瘤细胞凋亡的分子机制研究

Per2是维持机体正常节律必需的生物钟基因，已证实其影响细胞增殖周期和凋亡功能等，与许多恶性肿瘤的发生、发展、治疗和预后关系密切。我们首次发现Per1、Per2在人胶质瘤和非肿瘤细胞存在着明显差异；体外实验发现Per2高表达的C6胶质瘤细胞可见明显的G2/M期阻滞；在不同时间点给予射线照射，Per2高表达点的细胞凋亡率明显高于其他时间点，而给予pvDNA3.1（+）Per2质粒转染的胶质瘤细胞凋亡率也明显高于其它。显示Per2基因不仅抑制胶质瘤细胞的生长，且参与胶质瘤的细胞凋亡过程并起着关键作用，其分子机制过程尚不明确。我们拟研究人胶质瘤细胞接受射线照射后Per2基因通过调控ATM/ATR通路、p53及c-myc触发凋亡的分子机制及评测对P53蛋白稳定性影响；探讨Per2基因对胶质瘤细胞的生长的影响。阐明Per2基因调控胶质瘤细胞凋亡分子机制及核心位点作用，寻找胶质瘤有效的潜在治疗靶点。

Per2是维持机体正常节律必需的生物钟基因，已证实其影响细胞增殖周期和凋亡功能等，与许多恶性肿瘤的发生、发展、治疗和预后关系密切。我们首次发现Per1、Per2在人胶质瘤和非肿瘤细胞存在着明显差异；体外实验发现Per2高表达的C6胶质瘤细胞可见明显的G2/M期阻滞；在不同时间点给予射线照射，Per2高表达点的细胞凋亡率明显高于其他时间点，而给予pvDNA3.1（+）Per2质粒转染的胶质瘤细胞凋亡率也明显高于其它。显示Per2基因不仅抑制胶质瘤细胞的生长，且参与胶质瘤的细胞凋亡过程并起着关键作用。项目进一步通过细胞实验，可见Per2-shRNA慢病毒有效降低在人胶质瘤U343细胞中生物钟基因Per2的表达含量；Per2表达下调促进人胶质瘤成瘤；X线处理后，在X线处理后的24h、48h、72h各个时间点，跟Control实验组比较，Per2低表达的实验组DNA损伤更轻，凋亡率更低，且随着时间的增加，Per2低表达组的DNA损伤和细胞凋亡都开始递增；随Per2表达量的下调，ATM表达水平减少，p53表达水平减少，而c-myc的表达水平增加，MDM2的表达水平增加。进而阐明了Per2基因调控胶质瘤细胞凋亡分子机制及核心位点作用，为寻找胶质瘤有效的潜在治疗靶点提供了依据。