基于结肠粘膜上皮离子通道与多巴胺、5-羟色胺信号通路关联的疏肝健脾法治疗腹泻型肠易激综合征机制的研究

腹泻型肠易激综合征（D-IBS）是中医治疗的优势病种，但疗效机制不明确。我们前期研究显示：临床中医疏肝健脾法治疗D-IBS具有较好的疗效，基础研究则证明了结肠上皮离子通道及多巴胺（DA）、5-羟色胺（5-HT）信号通路参与胃肠功能的生理病理调节。本项目提出假说"中医疏肝健脾法治疗D-IBS主要是调节结肠黏膜离子通道及DA、5-HT信号传导，通过DA、5-HT及细胞受体-结肠黏膜离子通道的关联途经，影响结肠黏膜的分泌、吸收及肠道的运动、感觉等而发挥作用"。着重探讨疏肝健脾法对D-IBS大鼠结肠黏膜上皮短路电流（Isc）及其离子通道蛋白表达、DA、5-HT信号通路中DA能受体（D1, D2 和 D5等）、肾上腺能受体（α、β1和β2 等）、5-HT3R和５-HT4R以及细胞内信号cAMP或/和Ca2+浓度等方面的影响，旨在深化对D-IBS发病机制的认识，阐明中医治疗D-IBS疗效机制

按照课题任务书的计划，我们圆满完成了“疏肝健脾法治疗腹泻型肠易激综合征基于结肠黏膜上皮离子通道与5-羟色胺，多巴胺信号通路相关的机制研究”。首先，我们对疏肝健脾法及健脾法干预腹泻型肠易激综合征（D-IBS）模型大鼠的各项情况进行了对比研究，结合国内外相关文献，发现疏肝健脾法对D-IBS的干预效果在各个方面均优于健脾法，在此基础上着重探讨了疏肝健脾法治疗腹泻型肠易激综合征的机制，取得了较好的结果。①通过对大鼠一般情况观察可见使用乙酸灌肠加束缚应激造模与D-IBS的临床表现相近，而上诉表现经疏肝健脾法干预后均较模型组有明显好转。②疏肝健脾法可以改善D-IBS大鼠粪便含水量，排便次数，腹壁撤退反射（AWR) 和腹壁收缩情况，并对5-HT、SP、CCK及SS均有调节作用，提示疏肝健脾法可以有效治疗D-IBS，此治疗作用与调节胃肠激素有关。③疏肝健脾法对D-IBS大鼠结肠黏膜5-羟色胺通路相关的跨上皮电活动的作用是通过调节Cl-和HCO3-的分泌实现的；疏肝健脾法对D-IBS大鼠结肠黏膜5-羟色胺通路相关的跨上皮电活动的调节是通过位于结肠上皮顶膜的CFPR Cl-通道，以及位于基底膜的Na+-K+泵、NKCC、NBC、Cl-/ HCO3-交换器和基底膜K+通道共同作用的结果。④疏肝健脾法治疗D-IBS模型大鼠治疗作用的发挥与其对大鼠结肠黏膜多巴胺通路相关的Cl-及HCO3-转运的有关；这一调节过程主要由结肠黏膜顶膜侧Cl- 通道，基底膜侧阴离子交换体及Na+-K+-2Cl-共转运体等膜通道蛋白共同介导。⑤疏肝健脾法治疗D-IBS模型大鼠作用机理可能是通过影响5-HT3R、5-HT4R、多巴胺D1、D2和D5受体以及肾上腺素α1、β1和β2受体来调节肠神经系统，抑制肠道分泌，提高内脏痛阈，消除肠道过敏，降低肠道内脏高敏感，达到综合治疗的目的。⑥疏肝健脾法对D-IBS模型大鼠的作用与影响结肠黏膜组织cAMP和Ca2+的含量有关。