结肠黏膜肥大细胞活化与5-羟色胺受体相关的离子转运在疏肝健脾法治疗腹泻型肠易激综合征中作用的研究

Diarrhea-predominant irritable bowel syndrome（D-IBS）is an advantage disease of Traditional Chinese Medicine treatment, but its mechanism is unclear. Our previous study showed:"Shuganjianpi method for D-IBS has a good effect and the therapeutic effect is related to the regulation of 5-HT signaling pathway related ion transport in colonic mucosa.Meanwhile,neural-colon mast cell(MC) is IBS visceral high sensitive trigger point,MC activation synthesis release 5-hydroxytr -yptamine(5-HT) on colon related receptors, affect the gastrointestinal tract secretion and movement. Based on TCM theory of liver and spleen correlation and intestinal nerve-immune-endocrine network perspective,we put forward the hypothesis in this project:"Shuganjianpi method in the treatment of D-IBS mainly adjust the colonic mucosa MC activation, thus affecting 5-HT receptor related the colonic mucosa associated ion transport, playing a role of treatment through the colonic mucosa MC-5-HT-cell receptors-colonic mucous membrane ion channel correlation link, affect the bowel movement, sensory and colonic mucosa secretion, absorption".To explore the effect of Shuganjianpi method on the expression of colonic mucosa MC in D-IBS rat,5-HT3R and 5-HT4R expressed in MC and 5-HT signaling pathways of colonic mucosa epithelium.To elucidate the mechanism of D-IBS curative effect of TCM.

腹泻型肠易激综合征（D-IBS）是中医治疗优势病种，但其作用机制尚不明确。我们前期研究证明：疏肝健脾治疗D-IBS具有良好效果，这种治疗作用与调节结肠黏膜5-羟色胺（5-HT）信号通路相关离子转运有关。而结肠神经-肥大细胞（MC）是IBS内脏高敏感的触发点，MC活化合成释放5-HT作用于结肠相关受体，影响胃肠道分泌和运动。本项目基于中医肝脾相关理论及肠道神经-免疫-内分泌网络角度提出假说："疏肝健脾法治疗D-IBS主要调节结肠黏膜MC活化，进而影响5-HT与其相关受体关联的结肠黏膜离子转运，通过结肠黏膜MC-5-HT-细胞受体-结肠黏膜离子通道关联环节，影响肠道运动、感觉及结肠黏膜分泌、吸收等发挥治疗作用"。探讨疏肝健脾法对D-IBS大鼠结肠黏膜MC表达、5-HT3R和5-HT4R在MC中表达及在结肠黏膜上皮5-HT信号通路离子转运中作用的影响。阐明中医治疗D-IBS疗效机制。

腹泻型肠易激综合征（Diarrehea-predominant irritable bowel syndrome, D-IBS）是一种以反复发作的腹痛、腹泻为主要表现的功能性肠病，目前大量循证医学证据表明中药在D-IBS的治疗中具有独特的优势，其在缓解D-IBS临床症状、减少病情复发、提高生活质量等方面均有一定疗效，但其治疗机制尚未完全阐明，制约了其推广及应用。参考我团队前期研究成果及《肠易激综合征中医诊疗专家共识意见 (2017)》，本病以脾虚为发病之根本，肝郁贯穿始终，在健脾的同时，配合疏肝，肝脾同治，提出疏肝健脾为其治疗之大法。. 本研究依法立方，观察了疏肝健脾方对D-IBS大鼠的治疗作用，并与单纯健脾方对比，研究结果发现疏肝健脾组大鼠粪便含水量、 AWR评分、肌电图（EMG）积分变化率较模型组均降低，健脾方仅对粪便含水量及EMG积分变化率有改善作用，且疏肝健脾方（高、中剂量）组的粪便含水量更接近于正常水平，在气囊压力为40mmHg时即可降低大鼠AWR评分、EMG积分变化率，提示在改善大鼠粪便含水量及内脏敏感性方面，疏肝健脾方和健脾方均有一定疗效，但疏肝健脾方更优于健脾方。在良好疗效前提下，进一步，基于肥大细胞（Mast Cell, MC）-5-HT-5-HT receptor (5-HTR) 相关的离子转运通路本研究还探讨了疏肝健脾方和健脾方的疗效机制，发现二者可降低结肠MC表达、结肠5-HT含量、结肠组织及肥大细胞上5-HT3R表达，升高结肠组织5-HT4R表达，并可改善5-HT相关的Cl¯、HCO3¯、Na+的转运，且与5-HT3R、5-HT4R、cAMP依赖的Cl¯通道、Na+-K+-Cl¯共转运体、Na+-HCO3¯共转运体、Na+-K+ ATP酶的参与有关。. 该研究基于IBS发病之根本肝脾同治，疗效显著，尤其是在肠道高敏感方面，较单纯健脾方，疏肝健脾方在较低扩张刺激下即有较好疗效，其对疾病更敏感、起效更为快速，这对优化D-IBS治疗具有现实意义；且疏肝理脾方对神经-免疫-内分泌调节网络亦有改善作用，这充分体现了中医治疗的整体观，较目前西医治疗，其更具个体化、全面性，这对于弥补目前西药应用的局限具有一定价值。