测定了谷氨酸棒杆菌质粒PXZ10145全长4887bp的核苷酸序列,该质粒上存在包括ApaI等18种限制酶的单一切点,其它限制酶切点数目和位置也被定出,质粒上有8个可能的阅读框架,通过序列分析,确定了PXZ10145断裂生成缺失突变体PNAT65的两侧位点,在两个断裂点上有"ATCTAGC"7个碱基的同向重复序列.结合缺失实验,确定质粒复制必需区在Nael-Nrul的1.2kb片段上,复制起始区在Nael-Sall的0.3kb片段上.Xbal和Narl双切点约3.0kb具有氨霉素抗性活性,序列3515-4455片段是表达氨霉素所必需的.从DNA杂交实验表明,在谷氨酸棒杆菌10147中确实存在与PXZ10145特性片段高度同源的超螺旋组分.构建了棒杆菌-大肠杆菌穿梭质粒载体PSWY902,研究了质粒的稳定性和转化条件,
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数据更新时间:2023-05-31
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