天然自身抗体转基因小鼠中免疫耐受在1型糖尿病发病中的作用及机制

天然自身免疫失耐受作为自身免疫的核心问题，在诸如1型糖尿病等自身免疫性疾病发病中具有重要作用。近期大量研究表明，其很可能是1型糖尿病发病中众多免疫紊乱产生的起始因素，因此对天然自身免疫失耐受机制的澄清将有助于揭示病理性自身免疫的发病规律。目前，国际上尚无真正意义的天然免疫失耐受糖尿病小鼠模型。本研究在多年工作基础上，拟通过本课题组已成功构建的表达可识别胰岛素的天然自身抗体3B4转基因小鼠，利用糖尿病相关抗原免疫及与NOD小鼠杂交方法建立天然免疫失耐受糖尿病小鼠模型。通过体内和体外分析自身免疫糖尿病小鼠模型中自身反应性B淋巴细胞发育分化以及胰岛β细胞的功能状态等，明确淋巴细胞免疫耐受与胰岛生理及病理变化的关系，从而为阐明天然自身免疫失耐受在1型糖尿病发病机制中的作用，并最终揭示自身免疫性疾病发病机制提供重要的理论依据。

天然自身免疫失耐受作为自身免疫的核心问题，在诸如1型糖尿病等自身免疫性疾病发病中具有重要作用。本研究通过杂交可识别胰岛素的天然自身抗体3B4转基因小鼠与NOD小鼠，构建了天然免疫失耐受糖尿病小鼠模型，对高表达3B4自身抗体的天然免疫B细胞与小鼠糖代谢关系进行了研究。结果发现：（1）3B4 天然自身抗体可以识别包括胰岛素在内的多种抗原；（2）10 周、14 周OGTT 时3B4Tg+/NOD、3B4Tg+组小鼠血糖较野生型对照组均显著升高；（3）NOD、3B4Tg+/NOD和3B4Tg+ 小鼠血清中总IgM水平高于WT小鼠，且3B4Tg+/NOD和3B4Tg+小鼠胰岛素反应性抗体高于NOD小鼠；（4）与野生型小鼠相比，NOD、3B4Tg+/NOD 和3B4Tg+小鼠外周成熟B细胞明显向腹腔B1a 及脾边缘带（MZ）B 细胞分化；（5）不致病剂量STZ诱导3B4Tg+和3B4Tg-小鼠，3B4Tg+小鼠诱导后其OGTT试验30 min血糖明显高于3B4Tg-小鼠，且可在3B4Tg+小鼠胰岛观察到炎性细胞浸润。这些研究结果显示，天然免疫B细胞可以向特定亚群发育分化成熟并分泌自身抗体，高表达天然自身抗体小鼠无论是否具有NOD 基因背景均可出现糖耐量异常。因此，天然免疫失耐受可能是1型糖尿病糖代谢异常的发病因素之一。