基于MeCP2/IRAK1信号通路探讨解毒祛瘀滋阴方治疗系统性红斑狼疮的分子机制

Systemic Lupus Erythematosus (SLE) is an autoimmune disease involving multiple organ system. In recent years, more and more studies found when the MeCP2 / IRAK1 pathway is abnormal, it can cause the gene’ excessive expression such as TNF-α,IFN-α,resulting in the pathogenesis of SLE. Our research group study identified Jiedu Quyu Ziyin Decoction can effectively reduce the disorder of cytokine and autoantibody levels the SLE patients. Its mechanism for treating SLE may be achieved by adjusting the MeCP2/IRAK1 signaling pathway, then the prescription how to play a role in this signaling pathway, what is the molecular mechanism of action, are subject to be verified in experiment. This project through in vitro and in vivo experiment, giving the Jiedu quyu ziyin Decoction effect on Jurkat T cell and mouse macrophage RAW264.7 and MRL/lpr mice. After treatment, respectively to detect the protein of TNF-α,MeCP2,TLR7, TLR9,NF-kB, MyD88, IRAK1 and their mRNA expression levels. Further explore the mechanism of Jiedu Quyu Ziyin Decoction’s in the treatment of SLE lies in adjusting the disorder of MeCP2 / IRAK1 signaling pathways , correcting the excessive activation of CD+4T cells and IRAK1 protein kinase and then play a role in the treatment.

系统性红斑狼疮（SLE）是一种累及多器官的自身免疫性疾病。近年来越来越多研究发现MeCP2/IRAK1信号通路异常时引起TNF-α、INF-α等因子的过度表达，导致SLE的发病。课题组前期研究发现解毒祛瘀滋阴方可以有效降低SLE患者体内紊乱的细胞因子、自身抗体水平，其治疗SLE的作用机制可能是通过调整MeCP2/IRAK1通路来实现的，那么该方剂在此信号通路中如何起作用，作用的分子机制是什么，均有待于实验进行验证。.本项目通过体外、体内实验，给予解毒祛瘀滋阴方作用于Jurkat细胞、Raw264.7单核巨噬细胞和MRL/lpr狼疮小鼠，治疗后分别检测MeCP2、TNF-α、TLR7、TLR9、NF-kB、MyD88、IRAK1蛋白及mRNA水平。深入探讨该方剂治疗SLE的机制在于调节紊乱的MeCP2/IRAK1通路，从而纠正CD4+T细胞和IRAK1蛋白激酶过度激活而引起治疗作用。

项目背景：系统性红斑狼疮是一种累及多器官、多系统的自身免疫性疾病。中医药在SLE的治疗过程中一直起到重要的作用，“解毒祛瘀滋阴方”由“生地黄、炙鳖甲、青蒿、白花蛇舌草、积雪草、赤芍、丹皮、佛手、升麻、生甘草”10味中药组成。人体的免疫系统受到遗传与环境两大因素的调控，表观遗传调控机制在SLE的发病中起到重要作用，DNA的高甲基化状态可以抑制某些基因的转录，而低甲基化则激活相关基因转录过程。MeCP2通路在DNA甲基化的过程中起到重要作用。固有免疫系统在SLE的发病机制中也起到重要的作用，IRAK1在 SLE 病人中存在异常表达。.研究内容：1.通过jurkat T 细胞和MRL/lpr狼疮小鼠共同研究了解毒祛瘀滋阴方干预后MeCP2 分子机制的作用；2.通过MRL/lpr 狼疮小鼠腹腔巨噬原代细胞、骨髓巨噬原代细胞和MRL/lpr 狼疮小鼠共同研究了解毒祛瘀滋阴方干预后 IRAK1 分子机制的作用。.重要结果：1、解毒祛瘀滋阴方能缓解MRL/lpr狼疮小鼠的病情，改善肾脏病变，降低细胞炎性反应；还能调节CD4+T细胞MeCP2信号通路，升高MeCP2 mRNA 和 MeCP2 蛋白的表达水平。故我们认为该方对系统性红斑狼疮的治疗作用可能是通过对 MRL/lpr 狼疮小鼠 CD4+T 细胞中 MeCP2 基因通路的调节作用，阻止了 CD4+T 细胞的异常活化，减少了 IL-4、IFN-γ等细胞因子的产生，从而达到缓解 MRL/lpr狼疮小鼠病情的作用。2、解毒祛瘀滋阴方可以明显降低 MRL/lpr 狼疮小鼠腹腔巨噬细胞异常活化的IRAK1-NF-κB信号通路中促炎症细胞因子TNF-α和IL-6含量，IRAK1、NF-κB、TNF-α和IL-6 mRNA的表达和IRAK1、pIRAK1、TRAF6、IKBα、p-IKBα、IKKα+IKKβ、NF-κB和p-NF-κB蛋白的表达，从而达到抑制IRAK1信号传导，起到调节免疫功能的作用。3、解毒祛瘀滋阴方可以缓解MRL/lpr小鼠皮损，淋巴结及脾脏肿大，减轻血清抗ds-DNA抗体及尿蛋白，减轻小鼠肾脏病理性损害。.科学意义：课题通过体内外药理实验证实该方可能通过提高DNA甲基化表达水平，且下调IRAK1-NF-κB信号通路来起到治疗SLE的目的，项目的完成可以更好的为诊断和治疗该病提供新的有意义的方法和思路。