基于卵巢组织差异表达基因的多浪羊常年发情的分子遗传基础

多浪羊是新疆地方优良品种，其常年发情、四季产羔的繁殖特性是当前肉羊尤其是肥羔生产中应具有的重要经济性状和品种优势。本项目拟以多浪羊为研究对象，以季节性发情的哈萨克羊为对照，采用抑制性消减杂交(SSH)、斑点杂交和RACE等技术，筛选和克隆在发情期和乏情期卵巢组织中表达呈显著变化的基因5-8个，获得其全长cDNA序列；通过Northern杂交和定量PCR方法，研究这些基因的组织表达谱，及其在发情周期的不同阶段不同品种母羊卵巢中的表达变化规律；利用PCR-SSCP和PCR-RFLP方法进行基因多态性检测，研究不同绵羊品种间等位基因和基因型频率的分布，结合关联分析以及定量PCR验证，筛选出与多浪羊常年发情相关的优势基因型和SNP。研究结果将为寻找控制多浪羊常年发情的关键基因，充分认识多浪羊常年发情的分子机制提供科学依据，同时也为多浪羊优良遗传资源的保护、开发和利用奠定理论基础。

本项目采用抑制性消减杂交技术，成功构建了多浪羊（常年发情绵羊品种）和哈萨克羊（季节性繁殖绵羊品种）卵巢组织间正、反向抑制性消减cDNA文库；采用RT-PCR和实时荧光定量PCR等技术，筛选获得了部分差异基因的cDNA序列和绵羊组织表达谱；并在此基础上探讨了差异基因在不同绵羊品种、发情周期不同阶段性腺轴组织中的表达变化规律，结果提示部分基因可能具有启动绵羊发情和季节性繁殖的重要作用；获得了一批可能与绵羊繁殖季节性相关的SNP位点。研究成果为进一步揭示绵羊季节性繁殖机理提供了重要基础数据。