熊果酸调控MyD88转录活性逆转乳腺癌紫杉醇耐药的分子机制研究

Paclitaxel is the first-line treatment for breast cancer patients ,however the drug resistance is becoming increasingly serious which impacts its clinical application. MyD88 had been proved to play a key role in mediating paclitaxel resistant.Our previous study found that ursolic acid can effectively reverse the resistance of paclitaxel in breast cancer, inhibite the expression of MyD88 and promote the expression of the upstream miR-149. Therefore, it is suggested that ursolic acid can inhibit the transcription activity of MyD88 gene and reverse the drug resistance of breast cancer by regulating the miR-149/MyD88 pathway. Using paclitaxel resistant breast cancer MAD-MB-231 and MCF-7 cells, this project intends to observe the regulative effect of ursolic acid on miR-149/MyD88 signaling pathway, and reversing the resistance of breast cancer to paclitaxel. And secondly, we intend to investigate the mechanism of MyD88 expresssion regulation by miR-149 and the interference effect of ursolic acid by using overexpression or knock down of MyD88 and miR-149, and MyD88 3’UTR vector. The investigation of the molecular mechanism of ursolic acid on reversing breast cancer paclitaxel resistance will provide theoretical and experimental basis for the clinical application of ursolic acid in combination with paclitaxel treatment.

紫杉醇是治疗乳腺癌的一线用药，但由于原发性或获得性耐药严重制约其临床疗效。其中MyD88基因在乳腺癌紫杉醇耐药中起了重要调节作用。我们前期研究发现中药单体熊果酸能够有效逆转乳腺癌紫杉醇耐药，抑制MyD88的表达并促进其上游miR-149的表达。因此我们推测熊果酸可能通过调节miR-149/MyD88通路抑制MyD88基因转录活性，逆转乳腺癌紫杉醇耐药。本课题拟分别以乳腺癌MAD-MB-231和MCF-7细胞及其紫杉醇耐药细胞株为研究对象，研究熊果酸逆转乳腺癌紫杉醇耐药的作用以及对miR-149/MyD88通路蛋白及相关耐药蛋白表达干预作用，在此基础上通过过表达及沉默miR-149和MyD88、构建MyD88 3’UTR荧光素酶报告载体等研究miR-149调控MyD88转录活性的机制及熊果酸的干预作用。阐明熊果酸逆转乳腺癌紫杉醇耐药的分子机制，为熊果酸联合紫杉醇临床治疗乳腺癌奠定实验基础。

乳腺癌是全球女性最常见的恶性肿瘤，严重威胁着女性的健康和生命。紫杉醇是临床治疗乳腺癌的一线用药，但由于原发性或获得性耐药严重制约其临床疗效。其中MyD88基因在乳腺癌紫杉醇耐药中起了重要调节作用，我们前期研究发现中药单体熊果酸能够抑制MyD88的表达并促进其上游miR-149-5p的表达。本项目按照原计划重点了研究熊果酸逆转乳腺癌紫杉醇耐药的作用和miR-149-5p调控MyD88转录活性的机制以及熊果酸的干预作用，阐明熊果酸逆转乳腺癌紫杉醇耐药的分子机制，完成了原定计划研究内容。我们采用乳腺癌细胞及其耐药细胞株为研究对象，通过体内裸鼠成瘤和体外细胞实验证明熊果酸能够促进miR-149-5p的表达、抑制MyD88的表达，有效逆转乳腺癌对紫杉醇的耐药性；同时，miR-149-5p能够靶向调控MyD88的转录活性，进而调控MyD88下游PI3K/Akt信号通路，逆转乳腺癌紫杉醇耐药。此外，我们还发现熊果酸作用于乳腺癌细胞后KLF4表达水平显著增加，且KLF4能够调控乳腺癌细胞对紫杉醇的敏感性。通过三年的研究工作，课题组取得了一定的科研成果，累计发表受本项目资助的文章6篇（SCI论文2篇），申报发明专利2项，我们的研究结果阐明了熊果酸逆转乳腺癌紫杉醇耐药的作用和分子机制，为熊果酸联合紫杉醇临床治疗乳腺癌奠定了实验基础。