基于JAK/STAT3信号通路探讨滋阴解毒化瘀法调节不同体质狼疮鼠Treg/Th17细胞平衡的研究

Systemic lupus erythematosus (SLE) is difficult to treat. Shanghai famous Chinese medicine expert Chen Xiangjun, using Ziyin Jiedu Huayu method , has got a good effect in the treatment of systemic lupus erythematosus. Recent studies have shown that JAK/STAT signaling pathway is associated with the pathogenesis and development of systemic lupus erythematosus. So Ziyin Jiedu Huayu method , which may be a pathway for the treatment of SLE. Previous experiments showed that Treg/Th17 cytokines and transcription factors were found to be different in mice with different constitutions. So the hypothesis was put forward: Ziyin Jiedu Huayu method can regulate cell differentiation through different targets in the JAK/STAT signaling pathway. It can reveal the internal relations between "pathway - Constitution of TCM syndrome differentiation - differentiation" which may lay the material foundation for the theory of TCM. We will give Chinese medicine to MRL/Lpr mice of different consititutions, to mensurate the changes of signal molecules, cytokines and Treg/Th17 in the JAK-STAT3 signaling pathway. We will analyze The process of signal input, signal attenuation and termination of the JAK/STAT3 intervention pathway. The Target is to clarify the mechanism of yangyin jiedu quyu method on JAK/STAT3 signaling pathway, So as to prove the importance of TCM syndrome differentiation and treatment.

系统性红斑狼疮（SLE）是临床难治病，上海市名中医陈湘君采用滋阴解毒化瘀法（复方自身清）治疗系统性红斑狼疮疗效确切，新近研究表明JAK/STAT信号通路与系统性红斑狼疮发病与发展相关联，可能是该方治疗SLE的作用通路。预实验发现，不同体质狼疮鼠Treg/Th17细胞因子和转录因子存在差异，由此提出假说：滋阴解毒化瘀法可在JAK/STAT信号通路中通过不同作用靶点，调控细胞分化，“信号通路-中医体质-辨证论治”三者间存在内在联系，为中医辨证论治的理论打下物质基础；本课题拟对不同体质LPR狼疮鼠进行中药干预，测定干预前后JAK-STAT3信号通路中信号分子、细胞因子、及狼疮鼠Treg/Th17变化情况，对JAK/STAT3信号通路的信号传入、信号衰减和终止的过程进行分析，阐明滋阴解毒法对JAK/STAT3信号通路中细胞因子调控、细胞分化、抑制免疫反应的作用机制，证明中医辨证论治的重要性。

辨证论治是中药运用的前提，本课题对不同体质LPR狼疮鼠进行中药干预，测定干预前后JAK2-STAT3信号通路中信号分子、细胞因子及狼疮鼠Treg/Th17变化情况，评估蛋白尿及肾病病理情况。.研究结果显示:1.不同体质狼疮鼠肾脏受累程度存在差异，寒体组、热体组狼疮鼠肾脏受累较重，Th17/Treg细胞比率较高，可能是肾脏受累差异的原因之一；不同体质狼疮鼠在Th17细胞分化的JAK2/STAT3信号通路上的表达上存在一定差异：热体组狼疮鼠肾脏中pJAK2、pSTAT3蛋白水平较高，但血清Th17细胞相关细胞因子IL-6、IL-17水平较低，常体组IL-23水平较低；三组间，热体组狼疮鼠Treg细胞水平较低，肾脏Treg细胞相关细胞因子IL-10、TGF-β水平也相应减低。.2.滋阴解毒化瘀法对MRL/lpr狼疮鼠JAK2/STAT3信号通路有一定的调控作用，与对照组相比，中药组能明显抑制不同体质狼疮鼠IL-6、IL-17的表达，可一定程度降低热体组、寒体组IL-23的表达，对不同体质狼疮鼠JAK2、STAT3磷酸化蛋白水平的表达都有抑制作用。.3.中药在不同体质狼疮鼠间也存在疗效差异。使用中药后，热体组小鼠尿蛋白浓度显著下降，其机制可能是通过下调IL-6、IL-23的表达，降低JAK2mRNA、升高SCOS1mRNA，降低JAK2、STAT3磷酸化表达，进而抑制Th17细胞分化稳定，减少IL-17的分泌，减少免疫损伤及严重反应，同时中药对热体组Treg细胞及相关细胞因子IL-10、TGF-β的表达有明显促进作用，通过降低热体组狼疮鼠脾脏Th17细胞比率，提高Treg细胞比率，从而调节Th17/Treg细胞比率，进而改善肾脏病理，降低热体组24h尿蛋白定量，体现了辨证论治的重要性。.4. 滋阴解毒化瘀法可通过不同作用靶点调控Th17/Treg细胞分化，对热体组效果显著，证明“信号通路-中医体质-辨证论治”三者间存在内在联系，应充分注意到中药在不同体质间信号通路传导的作用差异。本研究为中药必须经过辨证论治来治疗疾病提供了理论依据。