消银方基于IL-6/STAT3信号通路调节Th17/Treg平衡治疗银屑病的机制研究

Psoriasis is a kind of chronic inflammatory immune-related skin disease. Studies have shown that Th1/Th2 and Th17/Treg balance play an important role. Xiaoyin recipe of our hospital are effective to treat psoriasis. The treatment mechanism may be related to the improvement of Th1/Th2 and Th17/Treg imbalance. IL-6 as a Th1-type cytokines has a key role in the regulation of Th17 cell differentiation The study based on IL-6 and IL-6/STAT3 signaling pathways. In K5.STAT3C mouse model and peripheral blood T lymphocytes, we detect the expression level of pathway related genes (STAT3, CyclinD1, c-Myc, SCOS3) , Th17 cell differentiation, as well as STAT3 transcriptional functions. We build target gene expression plasmid and transfect lymphocytes to elucidate the clear target. After clarifing the effect of Xiaoyin recipe to Th17 / Treg based on IL-6/STAT3 signaling pathway, the study provide experimental evidence and theoretical basis for further studying the pathogenesis of psoriasis, the modernization of traditional Chinese medicine treatment.

银屑病是一种慢性炎症性免疫相关皮肤病，研究显示Th1/Th2、Th17/Treg细胞平衡扮演了重要角色。我院消银方治疗银屑病有良好疗效，治疗机制可能与改善Th1/Th2、Th17/Treg失衡有关。IL-6作为Th1型细胞因子在调节Th17细胞分化中具有关键作用，那么IL-6及相关IL-6/STAT3信号通路是否为Th1/Th2与Th17/Treg失衡的联系点呢？本研究以IL-6/STAT3信号通路为着眼点，以银屑病K5.STAT3C小鼠模型及其外周血T淋巴细胞为实验对象，检测通路相关基因(STAT3、CyclinD1、c-Myc、SCOS3)表达水平、STAT3基因转录功能、以及Th17细胞分化，构建靶基因表达质粒并转染淋巴细胞，明确消银方作用靶点。阐明消银方基于IL-6/STAT3信号通路对Th17/Treg的影响，为进一步研究银屑病发病机制和中药现代化治疗提供初步实验依据和理论基础。

目的：银屑病是一种常见的慢性复发性炎症性皮肤病，目前尚无治愈方法。中药复方制剂消银方可有效缓解银屑病患者的病情，但其具体机制尚不明确。本研究通过建立咪喹莫特诱导银屑病小鼠模型，给予中药复方制剂消银方加以干预，评价消银方治疗实验动物模型银屑病样皮损的有效性。采用组织病理切片、免疫组化技术、流式细胞技术以及转录组测序技术检测消银方对实验小鼠皮肤组织形态、相关免疫分子、T淋巴细胞免疫功能以及可能作用靶点的影响，探讨消银方治疗银屑病的作用机制，为清热解毒、凉血活血类中药在银屑病治疗领域中的应用提供理论依据。.方法：选取C57BL/6雄性小鼠，采用5%咪喹莫特乳膏于小鼠背部或耳部外涂造模，并给予不同剂量的消银方药物干预，以雷公藤多甙作为阳性对照，观察造模前后小鼠皮损的变化情况。通过皮损组织H&E染色、Ki67免疫组化，检测各组别小鼠皮损组织形态学改变及相关分子的表达。制备小鼠真皮与皮肤引流淋巴结单的细胞悬液，使用流式细胞术检测T淋巴细胞亚群及其细胞因子的分泌。小鼠皮损表皮和真皮分离后进行RNA-seq检测。.结果：经咪喹莫特造模的小鼠皮肤可出现明显的红斑、肥厚和鳞屑，符合银屑病典型的病理学特征。高剂量消银方不仅可有效改善小鼠的皮肤损害，还可在银屑病小鼠模型的免疫记忆环节发挥疗效。模型组小鼠体内IL-17+γδT细胞比例显著高于正常对照组（P<0.001），而高剂量消银方可有效抑制银屑病模型小鼠体内IL-17+γδT细胞的活化。在对银屑病小鼠模型皮损RNA-seq检测过程中，应用高剂量消银方干预的小鼠模型与模型组在IL-17rd 相关基因的表达水平方面亦有显著性差异。.结论：高剂量消银方对咪喹莫特诱导银屑病小鼠模型具有较好的治疗作用，其作用机制与抑制小鼠模型体内IL-17+γδT细胞活化具有相关性，其中IL-17rd可能是消银方发挥治疗作用的关键靶点。