作用于SMAD3的RNA干扰的靶位点筛选、构建及其对肝纤维化作用研究

肝纤维化是多种病因所致的慢性肝病共有的病理过程，其中心环节为肝星状细胞的激活。转化生长因子β（TGF-β）及激活素（Activin）是主要的促肝纤维化细胞因子，对于肝星状细胞的激活有着重要作用。他们通过SMAD信号通路实现细胞内信号转导，其中SMAD3是TGF-β和Activin在 SMAD信号通路中共同的关键信号蛋白。通过特异性阻断SMAD3 蛋白表达，可同时解除TGF-β和 Activin促肝纤维化作用，从而有可能起到高效抗肝纤维化作用。本研究拟在前期小干扰RNA (siRNA )靶位点选择及构建经验基础上，利用慢病毒表达系统，构建SMAD3为靶基因的可内源性高效表达siRNA的短发卡状RNA（shRNA），利用体外肝星状细胞培养和四氯化碳大鼠肝纤维化模型，探讨shRNA对TGF-β/ Activin信号的阻断作用和对肝纤维化的影响，从而为肝纤维化的治疗提供新的治疗思路。