双峰驼胎盘免疫调节因子的免疫促进与抑瘤作用机理研究

Camels serve as an important means of transportation in the cold desert regions. Placental Immunoregulating Factor（PIF）is the po]ypeptid extract with immunoregulating effects from placenta. Recent findings demonstrate that immune function is associated with the occurrence and development of malignant tumour. Therefore, as a natural Immunoregulator, the PIF could antineoplastic by improving the immune function.We found that the Camel Placental Immunoregulating Factor（CPIF）can improve the nonspecific immune function. Therefore, the immunoregulatory activity and antitumor effects of CPIF were investigated in this study. Meanwhile, the effects and signal transduction mechanism of CPIF on the tumour will be studied by in vitro and in vivo experiment in this research. Furthermore, the relationship between the concentration of immunohancing and iantitumour effects of CPIF will be discussed. This study will provide a brand new idea and theoretical basis for prevention and treatment of tumour disease and improve the value of camel placenta as well.

双峰驼是我国沙漠等气候恶劣地区的主要交通工具，他们具有许多特殊的生物学特性。胎盘免疫调节因子（PIF）是从动物胎盘提取的小分子多肽类物质，具有很强的免疫调节作用。研究表明，免疫功能异常与恶性肿瘤的发生、发展有直接关系。因此，PIF作为一种天然的免疫调节剂，可改善机体免疫功能，从而发挥抗肿瘤作用。骆驼是一种抵抗力极强的动物，并且我们发现骆驼胎盘免疫调节因子（CPIF）具有增强机体非特异性免疫功能的作用。因此，本研究进一步明确CPIF促进机体免疫功能的作用及其信号转导机制的同时，通过肺癌细胞以及荷瘤小鼠等体内外实验，鉴定CPIF的抑瘤作用及机理，揭示CPIF是否通过调节免疫功能而起到抑瘤的作用。本研究将提高骆驼胎盘的医疗效果及利用价值，以及治疗肺癌等肿瘤性疾病的研究领域提供了崭新思路。

前期研究证明骆驼胎盘提取液具有增强小鼠非特异性免疫功能的作用，因此本课题研究的重点是探索骆驼胎盘免疫调节因子（Camel Placental Immunoregulating Factor, CPIF）的免疫促进作用以及其对肺癌的影响，明确其提高机体免疫功能的作用机制及抑瘤作用机理。本课题在以往的研究基础上完成了以下工作：制备骆驼胎盘提取液之后，通过小鼠免疫器官指数测定实验、碳廓清能力实验、腹腔巨噬细胞吞噬能力实验、血清溶血素等实验，鉴定其对小鼠非特异性免疫功能的影响，为后续研究奠定了重要基础；在此基础上，成功制备CPIF，并对其性质进行检测，采用紫外扫描法测定最大吸收峰、DNA浓度和pH值、通过SDS-PAGE法测定分子量、BCA蛋白浓度检测试剂盒测定其蛋白浓度、ABTS法测定CPIF总抗氧化能力；成功建立小鼠免疫抑制模型，并通过组织病理学、流式细胞术、酶联免疫吸附等试验验证CPIF对小鼠T、B细胞免疫、体液免疫促进功能及其机理；成功构建小鼠肺瘤模型，并通过组织病理学、ELISA法、荧光定量PCR法以及Western blot等方法，检测CPIF对各组小鼠血清中IFN-γ、IL-12水平变化及PD-1/PD-L1表达的影响，检测CPIF在肿瘤免疫逃避过程中的作用；通过细胞培养法、ELISA法、荧光定量PCR法以及Western blot等方法，检测CPIF对小鼠腹腔巨噬细胞极化过程的影响，结果显示CPIF能促进免疫抑制小鼠M2型巨噬细胞的极化，升高巨噬细胞Arg-1、CD206的表达水平，促进抗炎因子的分泌，从而增强机体免疫功能。本研究结果为深入研究CPIF的临床应用奠定重要基础，为预防和治疗肿瘤疾病提供了重要参考。