小胶质细胞源性的BDNF在骨癌痛痛觉过敏中的神经免疫机制

基于我室建立并改良的骨癌痛模型表明，脊髓小胶质细胞上TLR4的激活与痛觉过敏相关。BDNF是神经元-胶质细胞间"对话"的重要信号，这一神经痛后异常分泌的BDNF是由小胶质细胞上P2X4激活实现的。作为与神经痛相似又有其独特性的疼痛，骨癌痛状态下尚未发现存在类似BDNF介导的改变。我们预实验表明，脊髓小胶质细胞上P2X4参与骨癌痛痛敏的形成。且作为同时特异性存在于小胶质细胞上的受体，TLR4和P2X4间存在信号 "对话"。据此，我们推测，TLR4也许参与P2X4受体表达和BDNF释放的调节，且其"对话"参与骨癌痛痛敏的发生。本申请将结合在体、离体实验，采用siRNA、行为学，real-time PCR，Western Blot，EMSA,免疫组化等方法，通过分子水平（P2X4和TLR4受体）、细胞水平（小胶质细胞和神经元）以及整体水平（免疫和感觉系统）的"对话"来初探疼痛的神经免疫机制。

基于我室改良的骨癌痛模型表明，脊髓P2X4特异性存在于小胶质细胞表面，且其参与骨癌痛大鼠痛觉过敏的形成。此外，近年来研究表明，脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor，BDNF)是神经元-胶质细胞间"对话"的重要信号分子，这一神经痛后异常分泌的BDNF是由小胶质细胞上P2X4激活实现的。作为与神经痛相似又有其独特性的疼痛，骨癌痛状态下尚未发现存在类似BDNF介导的改变。据此，我们推测，脊髓小胶质细胞P2X4受体激活介导的BDNF释放可能参与骨癌痛痛敏的发生。本研究将结合在体、离体实验，采用siRNA、行为学，real-time PCR，Western Blot，ELISA，免疫组化等方法。.结果发现：1) 脑源性神经生长因子参与大鼠骨癌痛的发生;2) BDNF通过调控神经元NMDA受体功能参与大鼠骨癌痛的发展;3) 小胶质细胞上P2X4R激活介导的BDNF释放参与大鼠骨癌痛的发生;4) 小胶质细胞上的P2X4R与TLR4受体相互作用共同介导BDNF释放及骨癌痛的发生(1) P2X4R调控TLR4受体的活性及骨癌痛的发生;(2) TLR4受体调控P2X4R的活性及骨癌痛的发生..截止至2013年12月，2010-2013年标明本基金资助的已发表论文共16篇，其中SCI收录论文8篇；先后培养了硕士生4名，博士生2名。.以上研究为骨癌痛情况下小胶质细胞-神经元的活性和功能调节提供了新的思路，从而对骨癌痛的发生有更为深入的认识，并有望为该病的诊断和治疗带来突破。