氧化型维生素C调节胎盘内分泌机能的分子机制的研究

我们以前的研究表明还原型维生素C通过钠依赖的维生素C转运体2在调节胎盘内分泌中的重要角色（Wu X.,et al. Endocrinology 2008;149:73-83）。然而，氧化型维生素C（DHAA）是否具有胎盘内分泌调节作用以及作用机制是否与还原型维生素C相同尚无研究。本项目首先在体外培养的具有胎盘内分泌机能的人滋养层细胞来源的绒癌细胞上明确DHAA在转运进入细胞的动力学参数，并确立DHAA诱导孕酮和雌激素产生过程中激素合成酶的表达水平的变化。在此基础上进一步研究DHAA通过糖转运体GLUTs，调节激素合成所需的基质转运蛋白MLN64表达、MAPK和IkB激酶激活、氧化还原的信号途径而实现对激素产生的调节机制。另外，利用自身不能合成维生素C的ODS大鼠，在整体动物中明确体外研究所确立的DHAA调节胎盘孕酮和雌激素产生的效应和可能的分子机制。

维生素C（VitC）在体内以氧化型和还原型的形式存在，VitC补充不足导致妊娠妇女的高流产率，我们以前的研究表明还原型维生素C通过钠依赖的维生素C转运体2在调节胎盘产生甾体激素中的重要角色（Wu X.,et al. Endocrinology 2008;149:73-83）。然而，还原型VitC是否具有调节胎盘多肽激素产生作用，以及氧化型VitC（DHAA）是否具有同样的胎盘内分泌调节作用以及其作用机制尚无研究。本项目首先首先通过免疫荧光手段揭示了钠依赖的VitC转运体2表达在人类胎盘的细胞滋养层而非间质绒毛芯，进一步在人胎盘细胞滋养层细胞和人绒毛膜癌细胞株JEG-3细胞上，明确了VitC通过其钠依赖的VitC转运体2诱导人类胎盘多肽激素beta-hCG的产生，并利用分子生物学以及临床人类胎盘标本明确了VitC增加beta-hCG的产生是通过激活Sp1和TFAP2A转录因子支配的hCG基因转录而实现（Chen L.,et al. JCEM 2012;97:E1667-E1676）。确立了VitC在调控多肽激素的产生中的效应和可能的分子机制，提出了VitC在调控胎盘甾体激素和多肽激素产生中的重要角色，以及其可能的在人类妊娠维持中的不可缺少的地位。另外，利用人绒毛膜癌细胞株JAR细胞，进一步研究DHAA对甾体激素孕酮（P4）和雌激素（E2）产生的效应及可能的分子机制，我们的研究表明。DHAA通过糖转运体同样具有诱导JAR细胞产生E2而不是P4的效应，而DHAA的这一作用并不是通过其产生氧化应急的效应实现的，可能通过抑制JNK-c-jun-AP1通路、NF-κB通路或GSK3β活性，继而促进关键酶的表达而实现，DHAA调控胎盘甾体激素的作用进一步补充了VitC在人类妊娠维持提供中的重要角色。