RNA干涉(RNA interference, RNAi )通过双链RNA介导特异性降解相应序列mRNA,从而阻断基因表达。RNAi已被用于病毒感染防治和肿瘤治疗以及造血干细胞等方面研究。我们将RNA干涉应用于HCV感染基因治疗研究。我们首先使用小干涉RNA(siRNAs)表达框架体系在细胞内转录出HCV特异siRNAs,检测其对HCV基因表达的抑制作用,据此筛选有效siRNAs来构建质粒载体和逆转录病毒载体。将表达siRNAs的质粒载体或逆转录病毒载体转染稳定表达HCV部分基因和荧光素酶融合蛋白的Huh7细胞,通过NorthernBlot及观察荧光素酶的活性来检测RNAi对HCV基因表达的抑制效果。同时比较Huh7细胞内HCV特异性siRNA、核酶、脱氧核酶对靶序列的切割效率的高低。希望据此为HCV感染找到一个新的解决途径,并进一步对在哺乳动物细胞内实现RNAi的基础研究
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数据更新时间:2023-05-31
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