蛙皮抗菌肽 Brevinin-2GUb 促胰岛素释放作用及其分子机制研究

Brevinin-2GUb是从亚洲林蛙皮肤中分离到的一种抗菌肽，具有显著的促胰岛细胞胰岛素释放作用，有潜力成为一种新型糖尿病治疗药物，但其促胰岛素释放作用的调控机制仍不清楚。以往研究表明，AMPK、PKA、PKC、MAPK四种基因以及钙离子浓度变化与细胞胰岛素分泌过程密切相关，本研究拟在已获得重组表达的Brevinin-2GUb 基础上，以糖尿病大鼠为研究对象，采用实时定量 RT-PCR 法和Western blot 技术，观察重组 Brevinin-2GUb 给药后对大鼠β细胞中上述基因表达水平的影响，同时采用荧光双波长法检测给药前后细胞内钙离子浓度变化，进一步明确 Brevinin-2GUb 促胰岛素释放作用机制。

Brevinin-2GUb是从亚洲青蛙皮肤中分离到的一种抗菌肽，以其高效的促胰岛素释放作用和极少的副作用，受到国内外研究学者的广泛关注。然而，目前研究仅探索了蛙皮抗菌肽在体外细胞水平上的促胰岛素释放作用，对其在糖尿病实体模型上的活性研究却鲜有报道，而对其促胰岛素分泌作用调控机制更不清楚，这对其成为糖尿病治疗药物造成了很大障碍。本研究首先制备了重组Brevinin-2GUb蛋白，进而制备糖尿病大鼠模型，检测了 Brevinin-2GUb 对糖尿病大鼠β细胞胰岛素分泌功能的影响。同时采用实时定量 RT-PCR 法和Western blot 等技术手段，在蛋白和分子表达水平上，检测 Brevinin-2GUb 给药后对AMPK、PKC等信号途径相关基因和蛋白表达水平的影响，进一步明确了 Brevinin-2GUb 促胰岛素释放分子机制，为多肽类糖尿病治疗药物的开发和临床应用提供一定的理论依据。