IкBα野生型和突变型选择表达调节NFкB信号通路控制近交系小型猪异种移植延缓性排斥反应的机理研究

大量研究表明IкBα活化NFкB信号通路引起的血管内皮细胞II型激活在延缓性排斥反应中起关键作用，但突变的IкBα完全抑制NFкB信号通路将影响胚胎早期发育。本项目在细胞水平上通过时空特异性选择表达IкBα野生型和突变型调节NFкB信号通路，研究对近交系小型猪异种移植延缓性排斥反应的控制。首先将猪野生型和突变型IкBα基因同时构建到Cre/Loxp系统中，通过基因打靶置换血管内皮细胞基因组中的IкBα；接着，在正常时期表达野生型IкBα，在特定时期经Cre酶诱导删除野生型IкBα，表达突变型IкBα，使其永久抑制NFкB信号通路的活化。最后，通过RNAi抑制α1,3-GT基因的表达，再用人血清免疫血管内皮细胞，研究消除HAR后突变型IкBα对延缓性排斥反应的控制。本研究将为获得个体水平上选择表达野生型和突变型IкBα猪的研制提供细胞学证据，并为进一步发生的排斥反应等研究提供细胞水平的素材。