TFH细胞的稳态失调在重症肌无力发病中的作用及其调节的研究

Our previous study has showed the presence of overactivation and expansion of TFH cells in the peripheral blood of MG patients and the frequencies of circulating TFH cells were positively correlated with the levels of serum anti-AChR Ab.Therefore, we suggest the dysfunction of immune homeostasis may contribute to the immunopathogenesis of MG. The abnormal positive selection of the autoreactive B cells caused by the dysfunction of Tfh cells play an important role in the development of autoimmune disease. The optimal strategy for these disease is to inhibit the production of autoantibodies by regulation of TFH cells. Some research demonstrated that Treg cells can control the generation of autoantibodies and adjust the number and function of effector cells. However, functional defect of Treg cells has been observed in MG patients. Hence, we propose the following hypothesis: functional defect of Treg cells could lead to the overactivation and expansion of TFH cells and Treg cells and related cytokine participate in the regulation of TFH cells function. Our group will focus on the study of dysfunction of TFH cells in the immunopathogenesis of MG based on our previous research. We hope to further elucidate the MG immune pathogenesis and regulating mechanism of TFH cells with completement of this study and provide theoretical basis for immune-modulating therapy and specific therapeutic strategies targeted Tfh cells and Treg cells.

前期研究我们证实了MG患者外周血中存在TFH细胞过度激活和扩增，并与血清中AchR抗体浓度呈正相关，因此我们认为TFH细胞的稳态失调参与了MG的发生发展。TFH细胞对自身反应B细胞的异常阳性选择促进了某些自身免疫性疾病的发生发展，在TFH细胞水平抑制自身抗体的产生是较理想的策略。研究证实Treg细胞调控了抗体的产生和效应细胞的数量和功能，而MG患者体内存在不同程度的Treg细胞功能缺陷。因此，我们提出如下假说：MG患者体内存在Treg细胞功能缺陷，导致了TFH细胞的过度激活和扩增，Treg细胞及其细胞因子参与了对TFH细胞功能的调节。本课题组拟在以往研究基础上探讨TFH细胞的稳态失调在MG发病中的作用以及其调节机制，本研究的完成有助于进一步阐明MG免疫发病机制以及MG患者体内TFH细胞的调节机制，开发基于TFH细胞和Treg细胞的特异免疫治疗策略，提供免疫调节治疗的理论依据。

重症肌无力（myasthenia gravis，MG）是自身抗体所致的自身免疫性疾病。众所周知，滤泡辅助性T细胞（follicular helper T cell，Tfh）是B细胞产生抗体的重要辅助细胞，对于B细胞最终分化成为分泌抗体的浆细胞至关重要。本项目的目的在于阐明Tfh在MG患者中的特点及其辅助产生自身抗体的具体机制。. 在该项基金项目的执行过程中，我们发现MG患者胸腺以及外周血中Tfh均明显增多，并且胸腺细胞培养时分泌Tfh的效应细胞因子明显增多；胸腺和外周血中的Tfh与MG患者AChR-Ab浓度均呈正相关。Tfh与B细胞作用，在次级淋巴器官内激活匹配的B细胞使之进一步分化成浆细胞，最终生成抗体。MG患者增生胸腺中记忆型、抗体分泌型B细胞均显著升高；患者外周血中的B细胞表现出同样的特点。MG患者胸腺和外周血中Tfh和记忆型、抗体分泌型B细胞的数量均呈现显著的正相关关系。这表明MG患者体内Tfh的升高（特别是Th2型Tfh）可能导致了产生AChR-Ab抗体的B细胞数量的增多，进而导致自身抗体的产生。树突状细胞（dendritic cell，DC）在次级淋巴器官中诱导Tfh的形成。我们发现MG患者外周血中pDC（plasmacytoid DC）的数量减少，而mDC（myeloid DC）的功能却明显活化，这意味着在MG患者体内的内环境条件下会有更多的Tfh产生。. 胸腺作为MG患者的一个明确病灶，手术切除会使患者的肌无力症状得到明显改善。我们分析了手术前后MG患者外周血中的Tfh数量和CXCL13、IL21的血清浓度，发现手术在减轻患者临床症状的同时也降低了Tfh的数量和CXCL13、IL21的血清浓度，这说明胸腺切除造成病情的好转是由于减少Tfh的数量（或减少其效应分子）造成的，也间接说明胸腺中的这些Tfh可能导致了MG的发生。. 综合来说，我们通过密切结合抗体的产生过程和临床上有效的治疗对患者形成的影响这两条路径，以Tfh为切入点，部分证实了Tfh在MG发生、发展和治疗中的重要作用。