驴盲肠微生物多样性及日粮组成对其影响机理研究

In donkey cecum habitat complex and diverse microbes, which function the basis of cecum and plays an important role in the roughage digestion and donkey health. However, study on donkey cecum microbes is very rare. Restricted the donkey cultivate development.In order to make a research on donkey cecal microbial flora diversity and the influence mechanism of daily ration composition on microbial diversity of the donkey cecum, the study firstly applies genetic fingerprint analysis technology to analyze the diversity of the microbial flora in donkey cecum. On understanding the general characteristics of the donkey cecum microbial flora, it determines the changes in the cecal microbial diversity in the transformation process of real-time quantitative PCR technology from high-fiber ration to high-starch ration. At the same time, it determines environmental indicators in the cecum , feed digestibility , carbohydrate enzyme activity，retention time and blood lactic acid, analyzes daily ration composition, cecal microbial flora in the cecum , the relationship between the ration composition， cecal environment , feed digestibility，retention time and carbohydrate enzyme activity; it also discusses the general influence mechanism on cecal microbial flora in the cecum caused by the change of daily ration composition. Through this study, it discovers the cecal microbial diversity of donkey, determines the influence of daily ration composition on the cecal microbial flora, explores the influence of daily ration composition on the mechanism of the cecal microbes. It lays the foundation for further research on donkeys from the angle of the cecal microbial digestion of physiological function and the regulation of cecal microbes.

驴盲肠内栖息着复杂多样的微生物，是盲肠功能的基础，对粗饲料消化及机体健康起着关键作用。但目前对驴盲肠微生物多样性的认识非常有限，制约了驴养殖业的发展。.为研究驴盲肠微生物多样性和日粮组成对微生物多样性的影响及机理，本项目拟采用基因指纹分析技术对驴盲肠微生物区系的多样性进行分析；在了解盲肠微生物区系基本特征的基础上，采用实时荧光定量PCR技术测定从高纤维日粮到高淀粉日粮的转变过程中盲肠微生物多样性变化；同时测定盲肠内环境指标、饲料消化率、饲料滞留时间、碳水化合物酶的活性和血液乳酸含量，分析日粮组成、盲肠内环境、饲料消化率、饲料滞留时间、碳水化合物酶活性与盲肠微生物多样性之间的相互关系。通过研究揭示驴盲肠微生物多样性，确定日粮组成对盲肠微生物区系的影响，初步探讨日粮组成对盲肠微生物多样性影响的机理。.为从盲肠微生物的角度认识驴的消化生理机能提供参考依据，为进行盲肠微生物调控的研究奠定基础。

驴是典型的单胃草食动物，盲肠是驴营养物质消化的重要器官，驴的盲肠内栖息着复杂多样的微生物，是驴盲肠功能的基础，日粮中无法在胃和小肠中被消化吸收的碳水化合物（如纤维素和淀粉）到达盲肠，对盲肠微生物区系和盲肠环境的稳定起着决定性作用，并最终影响到饲料利用率、营养代谢、动物健康和动物生产性能等。探索日粮碳水化合物在盲肠内的消化代谢和对盲肠微生物的影响及规律，对饲料生产、动物饲养和动物生产性能的提高有积极的指导意义。.本项目采用3×3重复拉丁方设计，采用移动尼龙袋法分析了玉米、豆粕、稻草、苜蓿在驴盲肠前的消化率；使用全收粪收尿法分析了消化率和能氮代谢；采用宏基因组学法，分析了新疆驴盲肠内菌群多样性。同时分析了盲肠内环境指标；分析了葡萄糖（Glu）、乳酸脱氢酶（LDH）、乳酸等血清生化指标；采用盲肠尼龙袋法，分析了稻草和苜蓿在盲肠干物质降解率，NDF,ADF含量变化；用驴盲肠体外发酵评价了三种饲料的营养价值；分析了日粮纤维水平对干奶期新疆驴盲肠纤维素酶活性的影响。.结果发现：1.玉米的盲肠前消化率最高，其次为豆粕，苜蓿次之，稻草盲肠前消化率最低(88%＞83%＞45.7%＞25.2%)。2.能量利用率方面：随着日粮纤维水平的升高，日粮可消化能利用下降。日粮纤维水平对新疆驴代谢能的影响差异不显著（P=0.106>0.05）。3. 内环境分析发现高淀粉日粮组的盲肠pH明显低于高纤维组和常规组。日粮纤维水平对新疆驴采食后2h和4h氨氮浓度有显著影响。晨饲前乳酸含量最高的为高淀粉日粮，其次是高纤维日粮，最低的是常规日粮（4.295mg/100mL＞4.286mg/100mL＞4.159mg/100mL）；4.血液生化指标的分析发现日粮纤维对血清葡萄糖、尿素、总蛋白、球蛋白影响较大（P＜0.05）。5.盲肠体外发酵显示稻草干物质降解率随培养时间的延长而增加，但苜蓿在驴盲肠体外发酵降解率高于稻草。6.盲肠液中纤维素酶活力以高淀粉日粮最高，其次是常规日粮，酶活力最低的是高纤维日粮，日粮纤维的含量对新疆驴盲肠纤维素酶是有显著影响的（P<0.05）。