血吸虫虫源性免疫调节分子reSj16靶蛋白的识别与鉴定

"血吸虫免疫逃避"机制是血吸虫病防治研究的重要理论问题。通过释放虫源性物质主动调节宿主的免疫应答，是血吸虫免疫逃避的重要方式。Sj16是申请者克隆到的一个日本血吸虫新基因，研究发现：reSj16可以影响不同免疫细胞的成熟和功能，具有明确的免疫调节作用，但作用机制尚不明确。本研究将利用酵母双杂交和细胞内免疫共沉淀技术，筛选和识别reSj16可能的靶蛋白分子；采用实时定量PCR、Western blot和Confocal技术，观察该靶蛋白在抗原递呈细胞的表达和定位情况；采用纳米标记的reSj16和Confocal技术观察reSj16与细胞作用的动态过程；应用相应单抗的阻断实验，证实reSj16与其靶蛋白的相互作用。从而揭示Sj16免疫调节作用的分子基础并探讨其可能的信号转导通路。本研究将为阐明日本血吸虫免疫逃避机制提供新的理论依据，为血吸虫病疫苗研究和靶点药物开发奠定坚实的基础。

血吸虫免疫逃避机制是血吸虫病防治的重要理论问题，通过释放虫源性物质主动调节宿主的免疫应答，是血吸虫免疫逃避的重要方式。Sj16是一个日本血吸虫来源的分泌蛋白，具有明显的免疫调节作用，对其精确作用机制的研究对于揭示虫体在宿主体内免疫逃避的机制具有重要的指导作用。本项目通过对reSj16作用的信号通路的筛选和reSj16关键结构域和靶蛋白的研究，发现reSj16主要通过影响树突状细胞的成熟基因和NF-kB等通路基因来影响LPS诱导的树突状细胞的成熟和功能，确定了reSj16进入树突状细胞核抑制树突状细胞功能直接相关的关键结构域，证实了reSj16免疫调节的机制为reSj16通过关键核定位序列进入细胞核内，通过内源性IL-10依赖的途径影响树突状细胞的成熟和功能，提示Sj16可能通过影响IL-10基因的表达调控从而发挥其生物学功能的。同时本项目也对与reSj16相互作用的靶蛋白进行了筛选与初步鉴定，鉴定工作仍在进行之中。本研究揭示了虫源性物质Sj16免疫调节的精确调节机制，加深了对虫源性分子免疫调节机制，为最终寻找到确切的Sj16靶标分子奠定了良好的工作基础和指明了方向。